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（回想）植物组织培养原理： 从理论上讲，生物体的任何一个细胞都具有发育成 完整个体的潜能。但是在个体发育中,细胞并不能表现出全能性,而是分化成各种组织和器官。这是因为在特定时间和空间条件下,细胞中的基因会有选择性的转录翻译出各种不同的蛋白质,从而构成生物体不同的组织和器官。 什么叫分化？（其实质是什么?） 什么叫脱（去）分化、再分化？ 愈伤组织的细胞有什么特点？ 如何控制细胞的脱分化与再分化？ 植物组织培养的基本过程 （二）影响植物组织培养的因素 1、材料的种类、年龄及保存时间长短等 2、营养 3、植物激素 4、pH、温度、光照等条件 3、植物激素的影响 常用植物激素：生长素、细胞分裂素和赤霉素 生长素、细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素 在生长素存在的情况下，细胞分裂素的作用呈加强的趋势 激素的使用顺序、使用的量及比例影响植物细胞的发育方向 4、pH、温度、光照 pH控制在5.8左右 温度控制在18－22℃ 每日用日光灯照射12h 接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培养，培养期间应定期消毒 培养温度控制在18-22℃ 每日用日光灯光照12h 结果分析与评价 1、对接种操作中污染情况的分析 2、是否完成对植物组织的脱分化和再分化 3、是否进行了统计、对照与记录 4、生根苗的移栽是否合格 本课题内容小结 （五）移栽 移栽生根的菊花试管苗之前，应先打开培养瓶的封口膜，让试管苗在培养间生长几日。一般放置在20～25℃的遮荫环境中，适应5～7d。试管苗不萎蔫，有新生长的趋势，便可移栽。 1、打开封口膜 2、清洗转移 用流水清洗根部的培养基，将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间 3、移栽 幼苗长壮后，移栽到土壤中 固体基质型，含水量高、 蓄水性强、透性好，适合栽培 珍珠岩是一种火山喷发的酸性熔岩，经急剧冷却而成的玻璃质岩石，有弧形或圆形裂隙，如珍珠的结构，所以被命名为珍珠岩 。 蛭石是一种天然、无毒的矿物质，在高温作用下会膨胀的矿物。它是一种比较少见的矿物，属于硅酸盐。 （六）栽培 幼苗移栽后，每天观察并记录幼苗的生长情况，适时浇水、施肥，直至开花 1、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌） 2、外植体的消毒（酒精、氯化汞） 3、接种的无菌操作（酒精、酒精灯——灼烧） 4、无菌箱中的培养； 5、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。 在整个操作过程中，是如何来实现无菌环境的？ 　　培养过程中，是脱分化、再分化的过程，随着芽和根的形成，就具有了自养的能力，是由细胞到一个个体的演变过程。 　培养过程中为什么需要进行光照？ 思 考 五、课题延伸 1、一般来说，容易进行无性繁殖的植物，也容易进行组织培养 2、实例：芦荟、豆瓣绿、秋海棠、月季 营养繁殖 扦插 嫁接 压条 扦插 嫁接 压条 1、培育无病毒植株 2、 大规模培养愈伤组织（提取紫草素，治疗烫伤和割伤的药物以及染料和化妆品的原料） 4、基因工程中亦需用到植物组织培养的方法 （受体细胞为植物细胞） 植物组织培养的应用： 3、人工种子（解决有些作物品种繁殖能力差，结子困难或发芽率低等问题） (1)快速。　　常规的方法一棵花卉一年一般只能生产几株或几十株，但用组织培养的方法则每年可以繁殖出几万甚至数百万的小植株。 (2)全年生产。花卉组织培养是在实验室中进行，因条件可控，所以不受季节限制，可以全年进行连续生产。而常规的无性繁殖则受季节限制，只能在花卉生长季节进行繁殖。 组织培养优点 (3)经济效益高。 　　花卉组织培养快速繁殖所需要的空间小，在一个200平方米的培养室内一年可生产试管苗上百万株。 (4) 繁殖的种苗与母株有相同的遗传 基因。 可让优良的品种不断地延续。 　　指在组织培养过程中，培养容器内滋生菌斑，使培养材料不能正常生长发育，从而导致培养失败的现象。 一、污染的定义 二、污染原因 1. 细菌污染：菌斑呈粘液状，界限比较明显，一般接种后1－2天即能发现。主要是大肠杆菌和链球菌 2. 真菌污染： 　　菌斑呈绒毛状、絮状，界限不明显，伴有不同颜色的孢子接种后3－10天才能发现。主要是霉菌污染。 正常苗 污染苗 1、外植体带菌 2、培养基及接种器具灭菌不彻底 3、接种操作时带入 4、环境不清洁 三、污染途径 （一）防止外植体带菌 （二）保证培养基及接种器具彻底灭菌 （三）操作人员严格遵守无菌操作规程 （四）保证接种与培养环境清洁 四、污染的预防措施 （一）防止外植体带菌 1. 选择好外植体采集时期和采集部位 　外植体采集以春秋为宜 　优先选择地上部分作为外植体 　阴雨天勿采，晴天下午采 　采前喷杀虫剂、杀菌剂或套塑料袋 2. 室内或无菌条件下进行预培养 （一）防止外植体带菌 3. 外植体消