太空诱变玉米核育突变体的aflp及生化特性分析.pdfVIP

摘要 花粉及花药发育是植物发育生物学的一个重要研究领域。在高等植物的小孢子发 生发育及花粉成熟过程中，涉及到大量基因的协同表达，其中某个基因的结构或表达 发生变异，都将导致雄性不育。很多高等植物中都存在着雄性不育现象，对雄性不育 突变体的研究，不仅有助于了解植物的生殖规律，更重要的是它具有潜在的农业应用 价值，如雄性不育的利用。 1996年，四川农业大学玉米研究所通过太空诱变处理Jlll0-9号种子获得了一份雄 性不育突变体，经研究表明，该雄性不育突交体由一对隐性基因控制。可育株自交后 代群体可育植株与不育植株分离比例为3：1，姊妹交群体可育植株与不育植株分离比 倒为l：1。对该材料的细胞学观察、基因定位方面的工作已经开展，但是基因组对比 分析、mRNA差异表达和生理生化方面的工作还是空白。本研究以该突变体的姊妹交 六代分离群体为材料，从基因组DNA、转录的cDNA和生理生化三个方面对可育和不 育植株的花药进行了分析，得到的主要结果如下： I／IVY0 1．以可育和不育植株的DNA混合池为模板，选用56对EcoRI引物组合 进行基因组对比分析，筛选出4对有差异的引物组合，分离得到3条不育植株所特有 1条来源于玉米第10条染色体上的克隆(ACl877992)的同源性为990。 特异引物进行SCAR转化，但i拟对引物在8株不育单株和8株可育单株中都能扩增得到 与目的片段长度相同的条带，即扩增产物不能特异地区分可育植株和不育植株，AFLP 标记不能成功转化为sCAR标记。 3．选用16对EcoRI／Mse I引物组合对可育和不育植株的花药进行差异表达分 析，共回收得到9条差异片段，分别命名为Z1～Z9。同源序列比对发现，z2序列与 1条Zea zinc maysputative 成酶(ohalcone CoA 酰CoA脱氢酶(acyl z5和z8这3条差异条带在可育和不育植株的花药发育中的表达情况。研究发现，z3 只在可育雄穗刚抽出时表达；Z5除在可育早期不表达外，在可育的其它时期都表达， 且在不育雄穗完全抽出时也表达；而另一条可育特异条带z8则是一个上调表达的基 因，在雄穗抽出2～3cm时起始表达，雄穗完全抽出时表达量达到最大。 4．对可育和不育4个发育时期的花药的可溶性糖、淀粉、蛋白质和游离脯氨酸的 含量分析时发现，不同发育时期可育花药中的可溶性糖、淀粉、蛋白质和游离脯氨酸 的含量均高于对应时期的不育花药中的含量。其中，可育花药和不育花药的游离脯氨 酸含量差异最明显，在雄穗刚开始孕穗不久其含量已有较大差异。 关键词：玉米，太空诱交，雄性不育，AFLP，生化指标 Ⅱ Sterile CharacterofMale AFLPandBiochemical Analysis Induced InMaize Flight BySpace Geneticsand Lin-bi(Major：CropBreeding) Zhang DirectedProfessorCao by Mo-ju in mad isoneofthemost areas An