应用单克隆抗体elisa法检测啤酒中泡沫活性z4蛋白质的研究.pdfVIP

中文摘要 本论文研究了啤酒泡沫活性蛋白质(Fo锄-positivcp“慨i11)的一种关键组分z4蛋 Blot)和质谱分析(M够s 白质的最佳提取条件，及通过免疫印迹(wjsteIn spcc恤蛐)对 隆抗体，及建立了间接ELISA筛选方法，并在检测抗原方面得到初步应用。具体内容 如下： z4蛋白；透析过夜，用50rnmol·L4pH8．0Pbs缓冲液预平衡后的阴离子层析柱(DEAE S印hadexA．50)进行分离，最后用50rnIIlol·L-IpH7．5的Tris缓冲液预平衡后的凝胶层析 G．75)进行分离的方法，提取出高纯度泡沫活性z4蛋白。 柱(Sephadex 利用Z4蛋白质与等量的佐剂(第一次完全佐剂，第二次不完全佐剂)充分乳化后 过反复克隆筛选，最终成功地筛选出2株分泌特异性抗体的单克隆细胞株，分别命名为 示2单抗均具有较好的反应特异性，与浑浊蛋白、LTPl和z7无交叉反应。 最后利用ELISA方法的检测啤酒中的泡沫活性蛋白质，确定抗体包被的最佳工作 法用于检测啤酒中泡沫z4蛋白具有较高的特异性，重复性和稳定性。 关键词：啤酒，泡沫活性z4蛋白质，抗原，单克隆抗体，酶联免疫方法 ABSTRACT to T11isanicle mtllcf resear；chonhow the giv鹊a optimize sy咖matic ex仃actiI培 oft11emost of pIocedurcs protein2珥(one impo姗tcomponemfo锄一positiVe conc矧ming ofcombinationwBandmaSs ways protejn)，鹅welI嬲t0idemi母tlleproteiIlby spectfIlm BALB／cmicewerci姗∞llI】ized by aIlalysis．Fuml锄o∞，tlle p晡fiedp“)tein，锄dfinally咖 s删llsof obtailled a1．esome monoclorLal龇tibodyagains￡j弭wercsuccessflllly．There dctcctthecontent ill detailcd primaryappIicatio螂to of锄igcnbrc嘶ngprocess．TlIekcy conte]ntsofresearchareasfbllows： Inthefifst oft11is t0 stcp depos“mc other tIlen Z4 proteills，andpmteiIlw鹊depositedby tIIis觚tion aIlion dialyzedovenlight w嬲∞paratcdby ch