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水产品中大环内酯类抗生素残留量检测方法的研究 摘 要 大环内酯类抗生素(macrolide 化学结构是以大环内酯基团和糖衍生物以苷键相连形成的一类药物，对革兰氏阳性菌及支 原体有很强的抗菌作用。MALs广泛用于畜禽细菌性和支原体感染的化学治疗，同时也作 为生长促进剂添加于动物药品和饲料中，近年来在水产养殖中的应用也备受关注。然而由 于一些不合理的使用，水产品中会出现药物残留现象，对水产品的安全性构成了严重的威 胁，进而危害到人们的健康。本论文以螺旋霉素、吉他霉素、替米考星、泰乐菌素、红霉 素、竹桃霉素、交沙霉素为目标分析物，旨在建立同时检测水产品中多种大环内酯类抗生 素残留量的高效液相色谱法和高效液相色谱一串联质谱法。主要开展了以下几方面的研究 工作： 1)建立了水产品中5种大环内酯类抗生素：螺旋霉素、替米考星、泰乐菌素、吉他 霉素和交沙霉素残留量检测的高效液相色谱(HPLC)法。分别研究了色谱柱、柱温、流速、 梯度洗脱程序等液相色谱条件及前处理方法。试样经乙腈提取，旋转蒸发至干，磷酸盐溶 液溶解，正己烷除脂，OasisHLB固相萃取柱净化。采用梯度洗脱程序，ZORBAX Eclipse mmX150 lxg／mL-lO XDB．C18(4．6 mm，5“m)色谱柱分离。方法在0．1 I_tg／mL时峰面积比 率与质量浓度的线性关系良好，5种药物的线性相关系数均大于0．999。试验选择不同阴性 样品为试样，在0．10 1．tg／g、O．25I．tg／g、0．50I．tg／g添加水平下平均回收率为75．2％-110％， 相对标准偏差为2．74％～11．O％。螺旋霉素、替米考星、泰乐菌素、吉他霉素、交沙霉素的 检出限分别为10、10、20、50、20 1．tg／kg。该方法准确可靠，应用性好。 2)建立了水产品中7种大环内酯类抗生素：竹桃霉素、红霉素、吉他霉素、交沙霉 素、螺旋霉素、替米考星、泰乐菌素残留检测的高效液相色谱串联质谱(HPLC．MS／MS) 法。对鞘气压力、辅气压力、离子源温度、电喷雾电压等质谱参数分别进行优化选择出合 适的色谱和质谱参数。样品经乙腈提取，中性氧化铝和正己烷净化，以选择反应监测模 式检测，基质匹配标准工作曲线定量。在1～100ng／mL范围内，7种药物的峰面积与质量 浓度的线性关系良好职20．995)。试验选择不同阴性样品为试样，在4ixg／kg、20pg／kg和 40 出限为1lag／kg，定量限为4pg／kg。该方法简单，灵敏度高，重现性好，可为水产品@7kO 大环内酯类抗生素残留的检测提供技术支持。 行测量不确定度分析。根据测量不确定度的分析结果确定了影响测量结果不确定度的主 要来源有：标准溶液配制、加标回收率及回归方程引入的测量不确定度。因此在实际检测 工作中可针对性的采取相应的措施减少影响，以提高实验结果的准确性。 成行业方法标准送审稿，并将送与其他检测机构进行实验验证。 本文建立了水产品中多种大环内酯类抗生素残留同时检测的高效液相色谱法和高效 液相串联质谱法。该方法样品前处理较简便、检测结果准确，通过实验验证，这两种方 法对于该类药物的日常残留检测工作具有实际的参考和应用价值。 关键词大环内酯类抗生素，药物残留，水产品，高效液相色谱法，液相色谱一串联质谱 法，测量不确定度 II The ofDetection Methodsof Study MacrolidesResidualin Products Aquatic Abstract Macrolide akindofweak antibiotics(MALs)arealkalin