水稻脂肪氧化酶工酶缺失基因的rapd标记.pdfVIP

摘要 键酶，脂肪氧化酶的缺失可以减轻脂肪酶促氧化反应，延缓种子衰老，增加稻谷的耐 储藏性。水稻的米糠和种胚中，存在三种脂肪氧化酶同功酶LOXI，LOX2和LOX3。 LOXs缺失体是单隐性基因控制性状，LOXs的缺失并不影响水稻的生长发育。 随机扩增多态性DNA(RAPD)是近年来发展起来的一种分子标记技术，本研究利 用RAPD技术对皖鉴2090、DawDam及其近等基因系进行了初步分析。结果如下： 1本研究对几对LOXs材料的近等基因系的农艺性状进行了初步调查，结果可看 出。脂肪氧化酶缺失对农艺性状没有影响。 2稳定的RAPD体系是进行RAPD分析的关键。在试验中，分别研究了模板 DNA聚合酶浓度和退火温度等对体系扩增结果的影 DNA、dNTP、M92+、引物、Taq 响．确定了本实验室最佳的水稻RAPD反应条件：每20此反应体系含13止ddH20， 10×PCRbuffer(with M92+)2．O吐，dNTP(2．5mmol／L)lp,L，raqDNA聚合酶(O．5U／l_tL) 211L，DNA模板(50ng／皿)l此，O．20itmol／L引物lgtL。反应扩增程序为：94C预 变性2min，1个循环，94℃变性30see，36．5℃退火30SeC，72℃延伸90sec，扩增40 个循环，最后72℃延伸5min，4C保存。该体系重复性较好。 3在650个随机引物中，经多次RAPD重复实验，获得6个引物均能稳定地扩 增出特异性的DNA片段，与LOXs缺失基因紧密连锁：近等基因系间遗传背景具有 $2040847。 关键词：水稻；脂肪氧化酶：缺失；基因：RAPD II Abs打act Researchesinrecent indicatedthatthe years deterioration．Theof the oftherice absenceLOX leastin keycnzyme lipid maythus，at alleviate of seeds the degradation，and strengthen part．reduce aging，and storagestability rice rice．TherewerethreekindsofLOXs—-LOXl，LOX2andLOX3in chaffand embryo． TheabsenceofLOXsisinheritedwima recessivetraitandtheabsenceofLOXs single doesn’taffectrice growth． was Therandom carriedOUtin amplifiedpolymorphicDNA(RAPD)analysis Damandits mainresultswe