棉铃虫bt受体粘蛋白的免疫组织化学及cry1ab毒素在氨肽酶n上的结合区定位.pdf

摘 要 Bt毒紊是防治农业害虫的重要的生物农药。当利用转Bt基因棉花进行害虫治理时。化学农 药已经有很大程度的减少，同时某些昆虫也出现了对Bt的抗性，对农业生产产生严重的威胁。 目前，Bt毒素的作用机理和抗性机制还不是很清楚。 氨肽酶N(AminopeptidaseN，APN)，目前，CrylA毒素与中肠上受体的作用机制还不是很清楚， 为了进一步了解毒素与中肠受体之间的相互作用，在本论文中，利用免疫组织化学的方法分析了 钙粘蛋白在中肠上皮细胞的组织水平上的定位，并比较了敏感品系和抗性品系的棉铃虫中肠上皮 钙粘蛋白的免疫定位。此外，通过大肠杆菌表达的不同长度的氨肽酶N片段．利用Westernblot技 术来确定CrylAb毒素在结合区的定位。利用高碘酸氧化的方法确定氨肽酶N的糖基化对其与 CrylAb和CrylAc毒素结合的影响。 主要结果如下： 1． 钙粘蛋白是位于中肠上皮细胞的微绒毛的顶部，并且在整个中肠均匀分布，在中肠上 皮的底膜也有分布。此外，在细胞质中有微弱的染色，这表明钙粘蛋白在细胞质的反 面内质网上合成后，向微绒毛的顶端动态运输。从棉铃虫敏感品系和抗性品系的免疫 组织定位来看，钙粘蛋白的免疫定位