烟草吡哆胺-丙酸转氨酶的部分纯化与表征.pdfVIP

摘要 各种代谢反应与多种物质的代谢。烟草作为一种模式植物，也成为VB6研究的实验 性有关。吡哆胺-丙酮酸转氨酶(EC2．6．1．30，PyridoxaIIlille-pyruvate 对研究VB6代谢具有重要意义。虽然细菌体内PPAT已有广泛的研究，但是植物体内 PPAT的研究则尚未见报道。烟草是重要的经济作物之一，本文以烟草为研究对象， 提取并分析PPAT酶学性质，为深入研究PPAT的催化机制建立了基础。 Fast 本文通过冷冻干燥、DEAE．Sepharose G．100凝胶过滤柱层析，SP葡聚糖凝胶C．25阳离子交换柱层析等分离纯化技术，对 烟草PPAT进行分离纯化，并对其基本酶学性质进行分析。研究结果表明：该酶被纯 PⅧ既不能促进也不能抑制其反应的进行，苯肼、硼氢化钠、羟胺等几种典型的PLP． 依赖型酶抑制剂也不能抑制其活性；在最适反应条件下，测得反应底物吡哆胺和丙酮 制奠定了基础。 关键词：烟草；维生素B6；吡哆胺．丙酮酸转氨酶；纯化；酶学性质 Abstract ⅥtaIIlin the te吼fora虹ndofcheInjcal wtlich B6(VB6)isgeneral compoullds the矗eefonnsof the including formsof phosphate actsastheessential in (PMP)，pyridoxal-5’-phosphate(PLP)．PLPcoenZymemany met{lbolicconVersions0f砌nOacids．而6口ccDaSamodel usedasthe plant，also being for materialstheresearchof has thatthedeten]ninationof exper证1ental VB6。Itreported VitamersinfD6口ccD wasPLP、PL锄dPN VB6 plants byusinghighperf．ornlanceliquid wi血fluorescencedetectorandithasbeenlinkedt0stress in chromatography responses the ofan锄ino plants．Pyridox锄ine-pyruVate疵otransferasecatalysestmSfer group be帆eenPMand intoPLaIld waSinVolVedina pymVate L-al撕ne，it degradationpathway for wereextensiVe VB6．There researchesofPPAT舶mt11ebacteriaS，butuIltilenowmere wasno aboutthePw灯research丘omthe an caSh report plant．而6口c∞is