特早熟春性甘蓝油菜小孢子培养及dh系的遗传多样性研究.pdfVIP

摘要 小孢子培养技术能够大大缩短育种年限、提高育种效率、加速育种进程。青 海省气候冷凉，能够筛选出当地气候条件下高成胚特早熟基因型材料对于油菜遗 传育种意义重大。杂种优势作为自然界一种普遍的生物学现象，是提高作物产量 的一种有效途径。而遗传多样性研究是种质资源评价和杂种优势利用的基础，因 此充分了解亲本之间的遗传差异，将亲本材料划分成不同的遗传类群，有助于指 导强优势杂交组合的选配，从而快速有效地利用杂种优势。长期以来，人们探讨 了杂种优势预测的多种方法，但均表现一定的局限性，预测效果均不理想。近年 来分子标记技术的发展与应用，为深入研究作物杂种优势提供了崭新的方法和手 段。 本研究内容之一为：以19 份特早熟春性甘蓝型油菜进行小孢子培养，考察影 响小孢子培养的因素。本研究内容之二为：用SSR 标记研究62 个DH 系的遗传多 样性，从分子水平揭示其遗传差异；田间试验研究重点考察 31 个DH 系和其亲本 主要经济性状包括株高、单株角果数、每果粒数、千粒重、单株产量、小区产量 和含油量，用数量遗传学的方法研究其主要研究遗传多样性。本研究结果如下： （1）不同材料出胚率： 19 份材料（基因型）中有16 份均可出胚，不同材料 间出胚率差异很大，平均每蕾产胚量在0～10.51 个之间，其中，780 （R）×107-2 和小帐120 产胚率最高,分别达到10.51 和4.43 个／蕾。 （2）不同取材部位（主枝与分枝）产胚率的差异：分枝的每蕾产胚数大部分 都高于其主枝。 （3）低温处理对成苗率的影响：同一材料小孢子胚分别4℃低温处理0d, 10d, 20d。其中低温处理10d 成苗率最高，分别达到 53.7%和44.6%，比对照分别高出 32.5%和19%。同一材料2℃低温处理10d 成苗率高于4℃低温处理10d 的成苗率。 （4）利用30对SSR引物进行PCR扩增，1～31DH系和32～62DH系分别扩增出82、 80个多态性片段，其中多态性位点分别占总扩增位点的75.2%和74.1%，片段大小 介于120～900bp之间。每对引物在不同品系间的等位基因数在2～9之间,平均位点 为3.63个。1～31DH系PIC （位点多态性信息含量）变幅为0.06～0.85,平均为0.60； 32-62 DH系PIC变幅为0.06～0.86平均为0.56。聚类分析说明：通过小孢子培养获 得的DH系具有丰富的遗传多样性，并且来自不同组合的DH系的遗传差异大于同一 i 组合的DH系的遗传差异。 （5）SSR标记1～31DH系之间的遗传距离主要集中在0.2～0.4和0.4～0.6两个 范围内，占总数的63.6%，而0.4～0.6范围内的最多，占全部材料的34.8%。32～ 62DH系之间的遗传距离主要集中在0～0.2和0.4～0.6两个范围内，占总数的 61.7%，而0.4～0.6范围内的最多，占全部材料的35.5%。 （6）DH系主要农艺性状的遗传多样性分析：在欧式遗传距离为2.6时，可以 分为九个类群；欧式遗传距离数值主要集中在2.623～4.623，0.623～2.623和 4.623～6.623三个区间，表明大部分种质材料间的遗传基础较宽，遗传多样性比 较丰富,但与SSR分子标记得到的结果不完全一致。 （7）亲本144/北山繁所得的31 个DH 品系的千粒重、单株产量和含油量的变 异系数分别为 9.18﹪、15.07﹪和4.58﹪，说明有相当大的机会获得高千粒重、 单株产量和含油量材料。 （8）2795-8⊗品系与其亲本144 的含油量差异达到显著水平，这说明，可以 通过小孢子培养技术选育出高组合含油量的品系。 （9）DH 群体中，2793-4⊗、2786-2⊗、2782-6⊗、2804-4⊗、2767-7⊗、2800-4⊗、 2789-6⊗和2798-4⊗品系的千粒重为前八名，与其亲本144 的差异达到显著水平， 与另一亲本北山繁的差异达到极显著水平。这说明，可以通过小孢子培养技术选 育出高千粒重的品系。 （10）DH 群体中，2793-4⊗品系的单株产量最高，与其亲本 144 的差异不显 著，与另一亲本北山繁的差异达到极显著水平。这说明，可以通过小孢子培养技 术选育出单株产量比较高的品系。 关键词：特早熟春性甘蓝型油菜；小孢子培养；DH 系；SSR 分子标记；数量遗传 学方法