灰葡萄孢除草活菌株的诱变及其相关基因的差异显示.pdf

摘要 狄葡萄孢产生的毒素具有除草活性，有望开发成微生物除草剂。本试验以狄 葡萄孢Bc4菌株及由其诱变得到的突变菌株为材料，比较其所产毒素的除草活性 及所含除草活性物质的差异，并对调控获葡萄孢除草活性物质产生的相关基因进 行了研究，结果如下： 1．以扶葡萄孢Bc4为出发菌株，通过紫外线和化学诱变剂诱变分生孢子， 共获得50个菌株。经种子萌发法和茎叶处理法筛选，得到所产毒素除草活性比野 生菌株显著增强的3个突变菌株B1、B2、B3及除草活性几乎丧失的2个突变菌 株B5、B23。 2．摸索色谱条件，对各菌株产生的毒素进行HPLc分析，发现Bl、B2、B3 等突变菌株中各组分的含量均显著高于野生菌株，其最大吸收峰高均在野生菌株 的5倍以上。而菌株B5、B23毒素中各组分含量与野生菌株相比明显下降，两者 最大峰高值仅为BC4的39％和34％。遗传稳定性试验表明，供试菌株遗传稳定， 连续培养8代除草活性未变化。优化HPLc条件对强除草活性毒素进行分离纯化， 制备了4个组分，其中组分I和Ⅳ对马唐及反技苋具有很强的杀除活性。 3．利用mRNA差异显示反转录技术对野生菌株Bc4和部分诱变菌株进行差 异显示分析。对狄葡萄孢不同菌株表达的基因差异片段进行了分离、再扩增，通