阿维菌素高产菌的选育.pdfVIP

华中农业大学2008硕士论文 摘 要 阿维菌素(avermectins)是由阿维链霉菌(Streptomycesavermitilis)发酵产生的是一 组高效、低毒、广谱的杀虫抗生素，在医药、农业和畜牧业生产中有良好的应用， 并且具有广阔的市场前景。本文对工业生产阿维菌素的阿维链霉菌菌株进行了基因 工程改造研究。 个正调控基因通过接合转移法导入到阿维菌素工业生产菌株Z1中，检测其对阿维菌 素产生的影响。试验结果表明D瓣因有明显促进作用，阿维菌素产量提高了约30％； aver基因作用不十分明显；afsR和afsQlQ2基因使产素水平明显降低。 本试验进行了工业阿维链霉菌原生质体制备研究。试验结果显示阿维链霉菌原 和Z1菌株(SpcR)进行连续融合发现，经过连续5轮融合，融合效率可达41．6％， 并达到稳定。 以四株不同产量和来源的阿维链霉菌作为出发菌株，通过过五轮基因组重排处 理，比较发现，随着基因组重排的深入，重组群体中高效价菌株的比率例在逐步提 高。五轮基因组重排后得到了2株高产菌株，菌株F5．64和F5．170，其效价分别达 到3322 ug／mL和3328ug／111L。 关键词：阿维链霉菌；阿维菌素；D孵调控基因；aveR调控基因；afsR调控 基因，afsQl，afs妒调控基因；基因组重排技术 本课题由武汉天惠生物工程有限责任公司资助 阿维菌素高产菌株的选育 Abstract seriesof16一membered lactoneswith anthelmintic Avermectins，a macrocyclic potent andinsecticidal fermentationof avermitilis． activity,wereproducedthrough Streptomyces arethemosteffective and used They agriculturalpesticidesantiparasiticagents，and in and fields．Thishadstudiedthe widelymedical,veterinaryagricultural paper theindustrial avermitilisstrain modification． optimization电n Streptomyces bygenetic four inthe were discovered orfX,aver，aysR，afsQl，afs02poskiveregulatorygenes of four were genomeStreptomyces．Theregulatorgenes introducedinto Streptomyces avermitilisindustrialstrainZ1 transferand theavermectins through analyzed conjugal ofrecombinationstrains．Theresultshowedthattheaver