改进山羊精液液保存方法提高受精能力的研究.pdf

山东农业人学硕I：论文 中文摘要 通过长期或短期保存精液后进行人工授精是加速优秀种畜的繁育的 关键技术之一。精液长期保存的方法主要是冷冻保存。已证明，山羊精液 冷冻引起精子超微结构、生化和功能的损伤。应用冷冻保存的山羊精液输 精时，情期受胎率一直比较低(50％左右)。限制了该技术在生产中的应用。 因此，人们正在探索山羊精液短期保存即液念保存。这方面研究国内外报 道都很少，维持精子活力在3096以上的保存时『日J最长为7天，受胎率还未 见报道。液念保存山羊精液达到80％以上受胎率的时『日J很短，不超过72 小时。2005年我们实验室自己研制了一种液态保存稀释液mZAP，1：10 稀释后5℃条件下精子活力维持30％以上的时间达到了9天，这在国际上 当时已经是最长的液态保存时间了。这就为山羊精液液态保存研究提供了 一个非常好的基础，也让我们看到了液态保存的保存时|日J还是大有延长余 地的。因此，我们在此基础上进行了进一步研究，希望能够使保存时『日J进 一步延长。研究了降温速率，定期对保存的精液重悬浮一次，向mZAP 稀释液中加入不同含量的卵黄(O％。2％，5％，20％)，不同pH包被(pH6．04 和pH6，6)，包被后不同稀释比例，保存过程中对稀释液进行处理对保存 效果的影响。结果发现。50ml水降温方法造成精子活力下降是由于30到 15℃降温速率太快所致，每天对保存的精液重悬浮一次并未提高精液的保 存效果，在秋季向mZAP稀释液中加入2％卵黄保存效果最好，而在春季 以不添加卵黄为好，两种pH值包被后都提高了保存效果，包被后l：20 稀释保存效果最好，另外保存过程中对稀释液处理提高了mZAP和 果得到了提高，最终使精子保存时间延长到了13天，体外受精结果显示， 保存13天的精子对卵母细胞受精后得到了56．5％的卵裂率和13．6％的桑 囊胚率，低于鲜精的68．9％的卵裂率和18．9％的桑囊胚率，但仍有受精 能力。 关键词：山羊精液，液念保存，包被，稀释比例，稀释液处理，体外受精 Studiesonthemethodof of improvingliquidstorage semenand of goat elevatingfertilizing goat ability spermatozoa Artificial a of excellent insemination(AI)istechnology key accelerating breeder and orshort reproduction breedingbylong storagesemen．Long semenis of infrozen storage freezingstorage．The storagesemen，particularly and functional tothe state，causesultrastructural，biochemical damage inareductionof spermatozoaresulting m