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睾丸注射法制备带猪pid1基因的转基因兔的研究
waterMDAmodifiedmediummediumBaseDNADoubleDulbecco’SDMEMFABPKanPCRPlDlPPARPeroxisomeEDTAESTAET.AOCTotalT-SODTotalCDSLBLTRLVRNAnucleotideLuria.bertaniLentivirusreactionnucleicris.aceticY2303634SDSacidacidacidSodiumacid.EDTAantioxideaceticfatddH20dNTP‘distilleddiaminetetracellchaindismutaseterminaltrisIrfrllrlllllstemsulfateIMFIntramuscular1interaction.RiboIuIIIIIlilll
目录
摘要……………………………………………………………………………………………l
Abstract……………...…………………..j………………………………………:……………………………………。III.
1引言…………………………………………………………………………………………………………………….1
1.1转基因技术的研究进展…………………………………………………………………一1
1.1.1动物转基因技术……:…。:………………………………………………………………..1
1.1.2睾丸注射法的研究进展………………………………………………………………….3
1.1.3转基因动物模型的应用………:…………………………………………………………4
1.2影响肌内脂肪沉积因素的相关研究进展…………………………………………………6
1.2.1肌内脂肪与肉质的关系………………....……………………………………………….6
1.2.2影响肌内脂肪的因素…………………………………………………………………….6
1.2.3影响肌内脂肪的相关基因………………………………………………………………8
1.3磷酸酪氨酸互作结构域1基因相关研究进展…………………………………………lO
1.4本研究的目的意义………………………………………………………………………..11
2材料与方法……………………………………………………………………………………12
2.1试验材料………………………………………………………………………………….12
2.1.1试验动物与样品采集……………………………………………………………………12
2.1.2主要仪器…:…………:………:………………………………………………_………..12
3
2.1.3菌株和载体。-………………………………………………………………………….1
2.1.4酶和试剂……………………………………………………………………………….13
2.1.5主要数据库及生物软件…………………………………………………………………14
2.2试验方法………………………………………………………………………………….14
2.2.1主要试剂的配制……………………………………………………………………….14
2.2.2目的基因的合成…………………………………………………………………………l5
7
2.2.3载体构建………………………………………………………………………………..1
2.2.5仔代个体出生及相关处理……………………………………………………………..24
2.2.6仔兔的荧光检测………………………………………………………………………..24
2.2.7仔代个体阳性率检测……………………………………………………………………..24
2.2.8仔代个体生长性状测定……………………………………………………………….25
2.2.9仔代个体肉质性状测定……………………………………………………………………25
2.2.1O仔代个体的WesternBlot检测………………………………………………………27
3结果与分析…………………………………………………………………………………28
3.2合成目的基因全长……………………………………………………………………….28
3.3构建成功的重组质粒及
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