实验一红白细胞计数要点.pptVIP

实验一 红细胞计数、白细胞计数 实验诊断学 第一临床医学院检验医学系 实验诊断学教研室 实验内容 红细胞计数（Red blood cell count） 白细胞计数（White blood cell count） 手工显微镜计数法 细胞计数仪法 （直接计数法） （间接计数法） 利用电阻抗和（或）光散射原理 计数方法 一、红细胞计数（手工显微镜法） 用等渗稀释液将血液稀释一定倍数，充入计数池中，于显微镜下计数一定体积内的红细胞数，经过换算求得每升血液中的红细胞数量。 1. 原理 显微镜、微量吸管、改良Neubauer计数板 2. 器材 手工显微镜计数法原理 改良Neubauer计数板 充池 显微镜观察 细胞数/L 等渗稀释液 微量吸管 检测试剂：RBC稀释液 ①Hayem 稀释液：NaCl, Na2SO4，HgCl2 ②枸橼酸钠甲醛盐水溶液:枸橼酸钠，甲醛，NaCl ③生理盐水或含1%甲醛的生理盐水：仅在急诊或无上述两种稀释液时临时使用 改良Neubauer计数板 大方格→中方格→小方格 （9个） （25个） （16个） 充液位置 充液位置 为红细胞计数区域 压线细胞的计数原则： 数左不数右，数上不数下 为红细胞计数区域 3.检测方法 小试管加RBC稀释液2.0 ml。 采血，取血10 μl。 擦去管外的血，轻吹入试管底部，再清洗吸管2~3次，立即混匀。 混匀后充入计数室，静置3~5 min，高倍镜下计数。 检测方法 2ml稀释液 充分混匀 10μl血液 充池、静止 镜下计数 4.计算 男 性：(4.0～5.5)×1012／L 女 性：(3.5～5.0)×1012／L 新生儿：(6.0～7.0)×1012／L RBC/L＝5个中方格内RBC数×5×10×200×106 ＝5个中方格内RBC数/100×1012 RBC：△△△×1012／L 6.参考值 5.报告方式 二、白细胞计数（手工显微镜法） WBC稀释液: 冰醋酸3.0 mL（破坏红细胞） 蒸馏水97.0 mL 亚甲蓝（染色） 1. 检测方法 小试管加WBC稀释液0.38 mL。 采血，微量吸管取血20 μL。 擦去管外的血，轻吹入试管底部，再清洗吸管2~3次，立即混匀。 混匀后充入计数室，静置2~3 min，低倍镜下计数。 白细胞计数：用低倍镜计数出计数池内四角大方格中的白细胞总数。 2. 计算 WBC/L ＝ 3. 报告方式 ＝4个大方格内WBC数/20×109 4个大方格内WBC数 4 ×10×20×106 WBC :△△△× 109／L 手工显微镜计数的注意事项 采血时不要过分挤压。 取血量须准确，动作要迅速，防止血液凝固。 血液加入稀释液后，应立即混匀。 充池前要摇匀，一次性充池，不能产生气泡 压线细胞应数上不数下，数左不数右。