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GE Healthcare 层析介质的寿命与层析介质的清洗验证 前言 1.1 物料的类型: 在近 20-30 年生物技术在中国得到了迅猛的发展。随着生物 物料是指生物生产过程中含有目标产品的料液。物料的类型 制药技术的发展，生物药物的质量越来越得到重视。生物药 是影响层析介质寿命的关键因素。不同的物料中含有的杂质 物从研究到上市，其过程包括，实验室成果转化到临床试验， 不同。如：大肠杆菌的培养液中，培养液的上清液中约为10 最终由患者广泛应用。药物研发成功的关键是药物的有效性， 种蛋白，在外膜与内膜间的胞质中约含100 种蛋白质，而细 同时药物的安全性更为重要。我们需要在严格确保高质量的 胞膜内的细胞质中含有2000种蛋白质，在细胞质中还含有核 同时，不影响其有效性及工艺的稳定性。这就是法规部门的 酸、脂类等非蛋白的杂质。所以如果您的物料是大肠杆菌的 要求。 细胞破碎液，那么杂质就相当的多了。由于蛋白的种类不同， 所以在分离您的目标蛋白的时候，这些杂质可能发生沉淀、 清洗验证是工艺验证中的一项重要部分，验证是 cGMP 所要 变性、聚集等变化，污染堵塞层析介质。 求的“证明任何程序、生产过程、设备、物料、活动或系统 细胞外培养基 确实能导致预期结果的有文件证明的一系列活动”。 ~10 蛋白 脂多糖 在生物药物的生产过程中，层析技术是其中最关键的步骤。 70 A 生物药物通过培养，收集，经过层析介质的纯化，最终得到 70 A 外膜 符合要求的生物药物产品。在生物制药的分离纯化过程中， 培养的物料通过层析介质分离纯化，得到符合要求的目标产 肽聚糖 品。同时，物料中的杂质也污染了层析介质。这些污染物包 210 A 胞质 括：宿主的蛋白、核酸、脂类，培养过程中的代谢产物、内 ~100 蛋白 毒素、杂菌以及可能的层析系统的泄漏，试剂中的杂质。这 70 A 细胞内膜 些污染物在下一次的分离纯化中将污染目标产品。所以必须 去除或将其降低到安全水平。这就是我们所提到的层析介质 细胞质 的清洗 (CIP)过程。通过您的试验证明清洗有效且污染物的残 ~2000 蛋白 留已经降低到安全水平的工作就是清洗验证。层析介质是一 图 1. 大肠杆菌培养液中的蛋白组成 种消耗品，层析介质的经过一段时间使用，清洗后，污染物 的残留量超过了安全水平，那么层析介质的寿命就到期了， 又如：在抗体生产中使用Protein A 介质纯化。物料是CHO 细 只有更换新的层析介质才能保证生物药品的质量。 胞表达的上清液。在培养过程中如果培养的条件控制较好， 上清液的杂质相对较少，此Protein A的介质寿命就会较长。但 1、层析介质寿命的影响因素： 是如果CHO 细胞培养条件控制不好，细胞裂解，细胞中的蛋 ● 物料的类型以及该