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中国农业科学 2012,45(1): 170-177 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2012.01.020 不同冷冻方法对牛体外胚胎ATP 含量与ROS 水平的影响 赵学明, 杜卫华, 王 栋, 郝海生, 朱化彬 （中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，北京 100193） 摘要：【目的】探讨冷冻保存对牛体外生产胚胎能量代谢、有氧代谢造成的影响。【方法】采用常规法或玻璃 化法（open pulled straw，OPS 法）冷冻保存牛体外受精（in vitro fertilization，IVF）囊胚和体细胞核移 植（somatic cell nuclear transfer，SCNT）囊胚，利用ATP Bioluminescence Assay Kit HS II 和 GENMED ROS Assay Kit 检测了冷冻-解冻后囊胚ATP 含量和ROS 水平。【结果】 （1）IVF 和SCNT 囊胚OPS 法冷冻-解冻后存活 率（（93.25±5.17）%和（77.56±3.52）%）均显著高于常规冷冻法（（81.25±4.98）%和（49.41±2.24）%） （ P＜0.05）； （2）IVF 囊胚和SCNT 囊胚OPS 法冷冻-解冻后ATP 含量（（0.63±0.05）和（0.33±0.02）pmol） 均显著高于常规冷冻法（（0.45±0.03）和（0.22±0.01）pmol）（ P＜0.05）；但是均显著低于相应的IVF 或SCNT 新鲜囊胚（（0.76±0.04）和（0.40±0.02）pmol） （ P＜0.05）； （3）玻璃化冷冻IVF 囊胚、SCNT 囊胚ROS 水 平（（74.34±4.24）和（43.21±3.35）cps）高于新鲜IVF 囊胚（（48.52±2.65）cps）、SCNT 囊胚（（27.36±2.23） cps）（ P＜0.05），常规冷冻组则与此相反（（35.61±4.32）和（16.56±2.52）cps）（P＜0.05）。【结论】玻璃化 冷冻较适用于牛IVF、SCNT 囊胚冷冻保存；玻璃化冷冻和常规冷冻均显著影响牛IVF 囊胚、SCNT 囊胚中ATP 含量 和ROS 水平。 关键词：牛体外胚胎; 常规冷冻; OPS 法冷冻; ATP含量; ROS水平 Effect of Controlled Freezing and Open-Pulled Straw (OPS) Vitrification on ATP Content and Reactive Oxygen Species (ROS) Level of Bovine In Vitro Produced Blastocysts ZHAO Xue ming, DU Wei-hua, WANG Dong, HAO Hai-sheng, ZHU Hua-bin (Institute of Animal Science, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100193) Abstract: 【Objective 】 The experiment was designed to investigate the effect of cryopreservation on ATP content and ROS level of bovine blastocysts produced by in vitro fertilization (IVF) and somatic cell nuclear transfer (SCNT). 【Method 】 Bov