长期施用尿素对东北黑土中氨氧化古菌群落的影响.pdfVIP

中国农业科学 2016,49(2):294-304 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2016.02.010 长期施用尿素对东北黑土中氨氧化古菌群落的影响 1,2 1,4 3 1,4 1,4 4 2 1,4 周 晶 ，姜 昕 ，周宝库 ，马鸣超 ，关大伟 ，赵百锁 ，陈三凤 ，李 俊 1 2 3 （中国农业科学院农业资源与农业区划研究所，北京 100081 ； 中国农业大学生物学院，北京 100094 ； 黑龙江省农业科学院土壤肥料与环境资源 4 研究所，哈尔滨 150086 ； 农业部微生物产品质量安全风险评估实验室，北京 100081 ） 摘要：【目的】表征 34 年施肥条件下东北黑土中氨氧化古菌（AOA）群落特征，明确不同尿素水平对其丰度 和群落结构的影响，并与土壤化学性质进行关联分析，探讨引起影响东北黑土中 AOA 群落变化的主效环境因子， 为进一步揭示黑土土壤硝化作用过程和机制，以及改良施肥方式提供依据。【方法】依托黑龙江省农业科学院34 年长期定位试验，选取3组不同施肥处理：无尿素组（对照CK和磷钾处理PK）、一倍尿素组（单施一倍氮肥处理 N ，氮磷处理NP，氮磷钾处理NPK和氮钾处理NK）和二倍尿素组（单施二倍氮肥处理N ）共7个处理的耕层土壤 1 2 为研究对象，借助 454 高通量测序和 Real-time PCR 技术，以 AOA Arch-amoA 基因为分子标靶，解析不同尿素水 平对黑土中AOA群落组成和丰度的影响，并对AOA群落结构与环境因子进行相关性分析。【结果】随着尿素施用量 的增加，黑土中AOA 的 7 5 Arch-amoA 拷贝数由2.64×10 /g土壤显著降低至8.34×10 /g土壤，且黑土pH是引起其 数量降低的直接原因；OTU 水平上的聚类和非度量多维度分析（NMDS）结果均表明，相同尿素水平的各处理 AOA 群落结构相似，不同尿素水平处理间的AOA群落差异显著；冗余分析表明，土壤pH、水溶性有机碳和硝态氮浓度 是影响土壤AOA群落变化的主效环境因子（ P ＜0.05）；系统发育分析表明，东北黑土中AOA主要有 Nitrososphaera 和 Nitrosotalea 两个属：无尿素组中99.3%和一倍尿素组中90.1%的 Arch-amoA 序列归类于 Nitrososphaera，二 倍尿素组中 67.9%的 Arch-amoA 序列归类于 Nitrosotalea。【结论】本研究表征了长期不同施肥下黑土中的 AOA 群落特征，通过与土壤化学性质耦合分析，确定了引起黑土中AOA群落变化的主要因素。长期施用氮肥的黑土中， AOA Arch-amoA 拷贝数和群落结构受尿素施用量的影响显著，低倍尿素提高其多样性，而高倍尿素则使之降低， 土壤pH、有机碳和硝态氮浓度是导致AOA 群落差异主要因素。 关键词：尿素施用量；氨氧化古菌；土壤酸化；冗余分析；454测序 Effects of Long Term Application of Urea on Ammoni