天然产物化学的提取分离胡海清要点.pptVIP

胡海清 天然产物化学 第一节 天然产物的提取 2.渗漉法 为什么超临界流体是良好的萃取剂 液体 第二节 天然产物的分离 第二节 天然产物的分离 第二节 天然产物的分离 CMC-Na溶液的配制 浓度0.2～0.5%，一般用的浓度是0.3%。 浓度过稀，使用的时候薄层易掉粉 浓度过大，用硫酸显色加热易变黑 使用上清液 第二节 天然产物的分离 聚酰胺吸附能力强弱的判断 吸附柱色谱——被分离物质 柱层析吸附剂一般是100-200目 试样与吸附剂用量比约为1:60 可分为湿法装柱和干法装柱 湿法上样：洗脱剂溶解试样制成高 浓度溶液 干法上样：试样层尽量窄且平整 分配柱色谱法—基本原理 大孔吸附树脂层析法 烧杯 阳离子 树脂柱 渗漉筒 分液漏斗 如：阳离子交换树脂的作用原理 R-H+ + AlKH+ R-AlKH+ + H+ R-AlKH+ + NH4OH R-NH4+ + AlK + H2O R代表树脂，AlK代表生物碱。 离子交换层析 阳离子交换树脂： R-SO3-H+ + M+OH-? R-SO3-M+ + H2O 阴离子交换树脂： R3-N+OH- + M-OH+ ? R3N+M- + H2O 被分离成分由于酸性或碱性化合物的解离系数不同，结合能力也就有所区别。当用一定酸性或碱性溶液洗脱时，这些化合物根据解离系数的差异而被分离。 离子交换柱色谱——操作技术 树脂的预处理 装柱 上样 洗脱 再生 石油醚(流动相) 碳酸钙 (固定相) 色 谱 带 最早的色谱实验 二、色谱分离法 原理：利用混合物中各成分在固定相和移动相中吸附、分配及其亲和力的差异而达到分离。 色谱定义：是一种物理化学分离分析技术，它利用混合物中各组分在固定相和流动相间的分配系数的差异，让各组分在两相间进行多次分配产生明显迁移速差而得以分离。又称之为色谱分离法、层析法 按移动相分 气相色谱 液相色谱 按色谱原理分 吸附色谱 分配色谱 离子交换色谱 凝胶色谱 按操作方法分 柱色谱 纸色谱 薄层色谱 色谱的分类 薄层色谱法——定义 分类 吸附薄层色谱 分配薄层色谱 在平面载板上均匀涂布适宜的固定相形成一薄层，将欲分离的试样于薄层板上点样，随着移动相溶剂的移动展开，混合物中各成分获得分离的方法。 常用的吸附剂——硅胶 应用最为广泛! 粒径：200-300目 种类：硅胶G——硅胶+粘合剂煅石膏 硅胶GF254——含有荧光物质 硅胶H ——不含粘合剂煅石膏 硅胶HF254 ——含有荧光物质 常用的吸附剂——其它 氧化铝：碱性、中性、酸性三种规格。 聚酰胺：“氢键吸附”，对羟基类成分有很好的分离效果。 附子中乌头碱的限量检查，就是采用碱性氧化铝制备的薄层板 薄层色谱法——展开剂的选择 待测组分的Rf值宜控制在0.2-0.8之间 各组分斑点圆且集中 混合溶剂临用前新鲜配制 要根据被分离物质的溶解性、酸碱性、极性等性质，结合吸附剂的吸附性能，综合考虑，可选择单一溶剂或混合溶剂系统。 若分离某些酸性或碱性成分，可在所选溶剂中加入少量的酸或碱或将一小杯挥发性酸或碱放置色谱缸内。 操作技术——手工铺板 取一份吸附剂和三份水（或另加黏合剂），在研钵中向一个方向研磨混合成均匀糊状（无气泡和结块），均匀涂布在薄层板上。 玻璃板 层析专用玻璃板，清洗干净 用量 10×20CM，3g硅胶 黏合剂 0.2～0.5%CMC-NA溶液，0.3% 干燥 水平台面，室温下自然完全晾干 检查 表面光滑平整，均匀，无杂质 操 作 要 点 取蒸馏水1000ml，在加热并不断搅拌的条件下，缓慢加入羧甲基纤维素钠0.3g，至完全溶解。静置冷却，临用前取上清液备用。 裂开的薄层板不能使用! 操作技术—活化 涂布后的薄层先在室温下阴干，至完全干透后，在使用前置适当温度烘烤一定时间进行活化，然后置干燥器中备用。不同薄层活化条件略有不同。 硅胶 105℃-110℃ 30～60min 氧化铝 105℃-110℃ 30min 操作技术——点样 定量微升毛细管 薄层点样毛细管 溶液沸点适中，对成分溶解度好（甲醇、乙醇、氯仿、醋酸乙酯等）。 斑点不宜过大,以小于3mm为宜，采用多次点加法。点样量应适中。毛细点样管或定量毛细点样管尽可能往薄层板中间点。 操作技术——展开 预先用展开剂将密闭的色谱缸饱和片刻，然后将点样后的薄层板置缸内支架上，勿与展开剂接触，预饱和一定时间，