过量表达蔗糖转运蛋白基因增强转基因小麦的耐旱性.pdfVIP

中国农业科学 2015,48(8):1473-1483 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2015.08.02 过量表达蔗糖转运蛋白基因增强转基因小麦的耐旱性 1 1 2 1 1 1 胡梦芸 ，李 辉 ，庞建周 ，刘 茜 ，张颖君 ，孙丽静 1 2 （河北省农林科学院粮油作物研究所/河北省作物遗传育种实验室，石家庄 050035 ； 河北省农林科学院旱作农业研究所，河北衡水 053000 ） 摘要：【目的】创制过量表达TaSUT1A 的转基因小麦，分析 TaSUT1A 在转基因小麦中的遗传及其对干旱胁迫 的应答反应，选育抗旱的转基因小麦新种质。【方法】采用基因重组技术构建了TaSUT1A 表达载体，利用基因枪介 导法将该载体转入小麦品种科农 199，通过 Bialaphos 筛选、转化植株基因组 DNA PCR 验证获得转基因 T0 植株； 利用 RT-PCR 检测 TaSUT1A 在转基因 T 植株中的表达情况，在此基础上，对 3 个转基因系的 T 转基因植株进行抗 3 4 旱性鉴定和抗旱相关生理指标分析，验证其抗旱能力。【结果】经 PCR 检测和 RT-PCR 验证，获得了转TaSUT1A 小 麦阳性植株，与非转基因对照相比，20%PEG胁迫处理显著诱导了转基因株系根叶组织中目标基因 TaSUT1A 的上调 表达。抗旱鉴定和抗性生理分析显示，在 20%PEG 胁迫处理下，转基因株系的萌发率比非转基因对照平均提高了 32.8%，显著高于非转基因对照，并促进初生根的萌发和生长，初生根长和胚芽鞘长比非转基因对照平均增加了 81.72%和170.77%；在20%PEG 胁迫处理下，转基因植株叶组织中的蔗糖和可溶性糖平均提高了42.95%和36.56%， 根中蔗糖和可溶性糖平均提高了 58.01%和 43.01%，均显著高于非转基因对照植株；与未胁迫处理相比，20%PEG 胁迫处理后非转基因植株叶中的SOD活性由105.4 U·g-1 -1 FW升高到139.1 U·g FW，而转基因植株的活性由107.7 —115.3 U·g-1 -1 FW 提高到 168.2—211.6 U·g FW，显著高于非转基因对照，同时，转基因小麦株系的 MDA 的产生 较非转基因对照平均降低了37.47%，显著减少了MDA的产生。【结论】 TaSUT1A 在参与植物的逆境应答反应机制中 具有重要作用，促进逆境胁迫中小麦的萌发和生长，超量表达 TaSUT1A 可显著提高转基因小麦的耐旱能力。 关键词：小麦；蔗糖转运蛋白；转基因；干旱胁迫；可溶性糖 Overexpression of Sucrose Transporter (TaSUT1A) Improves Drought Tolerance in Transgenic Wheat 1 1