棉花花药全生育期均一化全长cDNA文库的构建和分析.pdfVIP

中国农业科学 2013,46(18):3743-3749 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2013.18.001 棉花花药全生育期均一化全长cDNA 文库的构建和分析 1.2 1.2 1 1 1 1 1 马建辉 ，刘 记 ，范术丽 ，宋美珍 ，庞朝友 ，魏恒玲 ，喻树迅 1 2 （中国农业科学院棉花研究所/棉花生物学国家重点实验室，河南安阳 455000 ； 西北农林科技大学农学院，陕西杨凌 712100 ） 摘要：【目的】深入了解棉花花药发育的分子机制，并为其不育机理的研究提供参考序列。【方法】构建棉花 花药全生育期的均一化全长cDNA 文库并测序获得9 896 条高质量的EST，利用生物信息学和荧光定量相结合法对 7 所得数据进行系统分析。【结果】该cDNA 文库库容为1.2×10 ，插入片段分布在1—3 kb。将所测得的高质量EST 进行拼接得到6 643 条unigenes，平均长度为779 bp。经过序列比对注释和生物信息学分析，得到一系列在棉花 花药发育过程中起重要作用的基因，并获得28 条参与花粉壁合成的基因。荧光定量结果表明，这些基因均在花药 发育前期优势表达，尤其是在四分体时期表达量最高。【结论】获得大量的棉花花药表达基因，并分析得到一些调 节棉花花药发育的重要途径以及参与棉花花粉壁合成相关基因。 关键词：陆地棉；cDNA 文库；花药；花粉壁 Construction and Analysis of Normalized Full-Length cDNA Library of Upland Cotton Anthers 1.2 1.2 1 1 1 1 1 MA Jian-hui , LIU Ji , FAN Shu-li , SONG Mei-zhen , PANG Chao-you , WEI Heng-ling , YU Shu-xun (1 Institute of Cotton Research of CAAS/State Key Laboratory of Cotton Biology, Anyang 455000, Henan ; 2College of Agronomy, Northwest A F University, Yangling 712100, Shaanxi) Abstract: 【Objective 】The objective of this study is to understand the anther development and make a firm foundation for sterile mechanism in upland cotton (Gossypium hirsutum L.). 【Method 】A normalized full-length cDNA library from anthers including the full development stage was firstly constructed and 9 896 high-quality ESTs were sequenc