基因pf40在玉米中的遗传转化.pdfVIP

中国农业科学 2009,42(9): 3334-3338 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2009.09.041 基因 pf40 在玉米中的遗传转化 李 博，于静娟，赵 倩，朱登云，敖光明 （中国农业大学生物学院/农业生物技术国家重点实验室，北京 100193 ） 摘要：【目的】基因pf40 来源于谷子未成熟种子 cDNA 文库，它或其同源基因普遍存在于禾本科植物中。初 步研究显示 pf40 具有促进分蘖（枝）的功能。本文旨在研究玉米的分蘖特性是否与 pf40 功能相关。【方法】以玉 米自交系Z3、Z31与Q31杂交组合的胚性愈伤组织为转化受体，用基因枪轰击法将 pf40 超表达载体（PF40HS）和 抑制表达载体（PF40R）导入玉米。然后观察 pf40 超表达和抑制表达两种不同表达类型的转基因玉米分蘖表型。 【结果】经潮霉素筛选和 PCR 检测，共获得 53 株 T代转基因玉米。通过对 T 、T 代转基因玉米的 PCR 检测以及 0 1 2 Southern 和 tRNA dot blot 分析表明，外源 pf40 已整合到玉米基因组中并得到表达，而且能稳定地遗传给下一 代；通过对转 pf40 玉米茎基部的分蘖表型的观察发现，无论是转超表达载体还是抑制表达载体的转基因植株与未 转基因植株均无明显差异。【结论】单独调控玉米中的pf40 或其同源基因并不能改变玉米的分蘖表型特征，玉米 中的pf40 或其同源基因的确切功能，尚待进一步研究。 关键词：pf40；玉米；转基因植株；分蘖（枝） Transformation of the Gene pf40 in Maize LI Bo, YU Jing-juan, ZHAO Qian, ZHU Deng-yun, AO Guang-ming (State Key Laboratory for Agrobiotechnology, College of Biology, China Agricultural University, Beijing 100193) Abstract: 【Objective 】 Isolated from the cDNA library of millet immature seed, the gene pf40 (or its homolog ) is ubiquitously distributed in cereal’s crop genome. Preliminary studies indicate that the gene pf40 plays a role in promoting tillering (branching). This study aimed to clarify whether the function of gene pf40 (or its homolog) is related to the tillering in maize. 【Method 】 Two plant expression vectors with sense and knock-out (RNAi) gene pf40 promoted by 35S promoter were introduced into the embryogenic callus of maize hybrids(Z3, Z31, Q31) through particle bombardment. Regenerated plants were verified to be transgenic by PCR amplification, South