马铃薯蛋白酶抑制子StPI基因的克隆及表达分析.pdfVIP

中国农业科学 2007,40(9):1877-1882 Scientia Agricultura Sinica 马铃薯蛋白酶抑制子 StPI 基因的克隆及表达分析 1,2 1 1 1 1 李广存 ，金黎平 ，谢开云 ，李 颖 ，屈冬玉 1 2 （中国农业科学院蔬菜花卉研究所，北京 100081 ； 山东省农业科学院高新技术研究中心，济南 250100 ） 摘要：【目的】克隆马铃薯蛋白酶抑制子基因 StPI 的全长 cDNA。【方法】以马铃薯高抗青枯病二倍体基因 型ED13为材料，采用RACE方法进行 StPI 基因全长cDNA的克隆，利用半定量RT-PCR方法进行该基因的诱导表达 分析。【结果】获得了 StPI 基因的全长 cDNA，序列分析表明：该基因具有完整的开放阅读框架，编码 116 个氨 基酸，与马铃薯蛋白酶抑制子 I 前体具有较高的同源性（核苷酸和氨基酸序列同源性分别为 89%和 74%）。该基 因同时受青枯病菌的诱导和茉莉酸的调节，在6～12 h内即达到最高表达水平，但二者又有明显不同。相对而言， StPI 基因受青枯病菌的诱导较弱，而受茉莉酸（JA）的诱导较为强烈，在JA处理3 h表达量即明显升高，6～12 h 迅速升至最高。【结论】本研究从马铃薯抗青枯病基因型 ED13 中获得了 StPI 基因的全长 cDNA。该基因可能参 与了马铃薯的抗青枯病反应，且病菌处理对该基因的诱导可能与JA刺激具有相似或相同的信号途径。 关键词：马铃薯晚疫病；RACE；StPI 基因；全长cDNA；基因表达 Cloning and Expression Analysis of Proteinase Inhibitor Gene StPI in Diploid Potato 1, 2 1 1 LI Guang-cun , JIN Li-ping , XIE Kai-yun, LI Ying, QU Dong-yu 1 ( Institute of Vegetables and Flowers, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081; 2Bio-Technology Center, Shandong Academy of Agricultural Sciences, Jinan 250100) Abstract: 【Objective 】Experiments were performed to clone the full-length cDNA of potato proteinase inhibitor gene (stPI). 【Method 】RACE strategy was used to clone full-length cDNA of StPI from Ralstonia solanacearum (Rs) resistant potato genotype ED13. Rs and jasmonic acid (JA) induced expression patterns were analyzed by performing semi-quantitative RT-PCR. 【Result 】A full-length cDNA of StPI with completed open reading frame of 116 amino acids was cloned. BLAST search aga