bt水稻对靶标虫二化螟的生物学与病理学效应.pdf

中文摘要 本文以转c∥lAb基因粳稻(Bt水稻)，“克螟稻1号”、“克螟稻2号”及其 亲本对照秀水11为材料，研究了Bt水稻对靶标害虫二化螟Chilo suppressalis 、／ (Walker)的生物学与病理学效应，，『主要结果如下： ‘ 1．Bt水稻对二化螟3龄和5龄幼虫取食、生长及存活的影响。结果表明， 不同温度下3龄和5龄幼虫取食Bt水稻后，其取食量、体重增长和存活率均极 显著低于对照。在试验温度范围，即24C、27℃和30℃内，温度对3龄幼虫取 食、生长和存活无显著影响，但对5龄幼虫的取食和体重增长则有显著影响。幼 虫死亡率与其取食Bt水稻的累计食量间存在着正相关关系。 2．Bt水稻对二化螟幼虫的致死和亚致死作用。结果表明，l龄、3龄、5龄 幼虫持续取食“克螟稻1号”后，死亡率极高，5龄虽存活了较长时间，但不能 正常化蛹。而当取食“克螟稻l号”一段时间后，改以亲本对照“秀水11”为 食时，除在初期死亡较多外，死亡率不随时间而显著增加，能存活至下一龄期， 部分还可化蛹，且幼虫总的历期与对照组差异不显著。幼虫取食一定时间的“克 螟稻1号”后改食对照时，除l龄外，3龄和5龄幼虫经处理后所得的蛹能羽化， 其中3龄幼虫经处理后所得的成虫体重和体长与对照组差异不显著，而5龄幼虫 经处理后所得的成虫体重和体长均显著低于对照组，但羽化率和产卵量并不显著 低于对照组。 3．Bt水稻对二化螟幼虫中肠的组织病理效应。取食Bt水稻后，二化螟5 龄幼虫中肠上皮细胞的线粒体首先发生形态变化，随取食时间延长，线粒体出现 凝聚、内嵴破坏、空泡化等；内质网的变化也非常明显，病变过程伴随着粗糙内 质网的肿胀、核糖体脱落等。此外，在病变过程中，细胞质内出现了粗糙内质网 增多、呈圆圈状排列等现象；组织病变程度不一，部分细胞在早期就出现空泡化； 核的变化较小，后期出现核拉长、核仁凝聚等变化；杯状细胞除具有上述特点外， 杯腔底部的细胞质突起变化非常显著，表现为突起拉长、脱落成膜性结构，最后 破碎、消失，线粒体则呈凝聚态随突起脱落或沿杯腔边沿单～排列。 4．Bt水稻对二化螟幼虫血细胞免疫系统的影响。结果发现Bt水稻对二化 螟幼虫的血细胞影响极大，各类血细胞都明显低于对照组(原血胞在取食初期例 lI 外)．随取食时间延长，各类血细胞数量(DHC)及血细胞总数(THC)均呈递减的趋 势。从各类血细胞所占血细胞总数的百分比来看，浆血胞在取食后比例下降，而 颗粒血胞则比例增加，其余珠血胞、囊血胞的变化不明显。 5．Bt水稻对二化螟肠道消化酶的影响。结果表明，二化螟幼虫肠道消化液 包括两大类蛋白酶，即类胰蛋白酶和类胰凝乳蛋白酶。幼虫取食Bt水稻后弱碱 性类胰蛋白酶和类胰凝乳蛋白酶的活性总体呈下降趋势，而强碱性类胰蛋白酶在 摄入Bt水稻后活性则呈上升趋势且高于对照组。 6．Bt水稻对二化螟幼虫取食行为的影响。结果表明，幼虫对对照的选择系 数显著高于、甚至极显著地高于Bt水稻。而在两种Bt水稻品系间，幼虫对克螟 稻1号的选择系数要高于克螟稻2号，与它们各自的抗虫性水平是相一致的。二 化螟3龄幼虫在转Bt基因水稻上的钻蛀次数、蛀入时间等方面都高于对照，而 蛀入成功率则比对照为低，但差异都不显著。在钻蛀部位的选择上，幼虫都表现 出喜好植株茎杆部位，其次是叶片主脉。 关键词Bt水稻，二化螟，生长发育，致死效应，亚致死效应，组织病理，免 疫系统，取食行为 III 致 谢 本论文是在导师胡萃教授的悉心指导下完成的。从选题、实验设计到论文的 最后完成，都凝聚着导师的大量心血。如果没有导师的培养和指导，本文难以问 世。值此论文付梓之际，谨向导师表示衷心的感谢。 在实验过程中，得到了很多老师、同学和朋友们的无私帮助。浙江大学应用 昆虫研究所叶恭银教授为论文工作的顺利进行提供了无私的帮助和指导，浙江大 学核农学研究所舒庆尧教授提供了实验用水稻材料；姚洪谓博士为实验的顺利进 行提供了诸多方便和协助；浙江大学生物研究所徐云老师帮助完成电镜观