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小鼠zfy基因nai病毒载体的构建及性控效果的观察
TheconstructionofRNAiviralvectorand
observationofsexcontrolfromMusZfygene
ADissertationSubmitted to
Shihezi University
Shihezi University
SShhiihheezzii UUnniivveerrssiittyy
InFulfillmentoftheRequirements
fortheDegreeof
MasterofAgriculture
MasterofAgriculture
MMaasstteerrooffAAggrriiccuullttuurree
By
By
BByy
MaJun-de
MaJun-de
MMaaJJuunn--ddee
(AnimalGenetics,BreedingandReproductionScience)
DissertationSupervisor:
DissertationSupervisor:
DDiisssseerrttaattiioonnSSuuppeerrvviissoorr::
JiaBin
JiaBin
JJiiaaBBiinn
June,2013
本研究由以下项目资助:
“兵团博士资金专项” (项目编号:2012BB016)
Doctor’sSpecialFund ofXinjiangProductionandConstructionCorps(project
number:2012BB016)
“石河子大学研究生创新基金”(项目编号:YJCX2010-Y02)
CreativeFoundation ofShiHeZiUniversity(projectnumber: YJCX2010-Y02)
摘 要
本研究采用逆转录病毒载体介导的 RNAi 技术靶向抑制性别决定相关基因
Zfy的表达,研究 Zfy基因在生精过程中的相关功能及小鼠后代性别比例的变化。
通 过 构 建 逆 转 录 病 毒 载 体 Retrovirus /Zfy-shRNA 和 质 粒 载 体
Psilencer/Zfy-shRNA,用构建好的病毒载体和质粒载体转染小鼠生精细胞,应
用 qRT-PCR 检测各组细胞中 Zfy基因的 mRNA 表达水平,验证干扰载体对 Zfy基因
的沉默效应。大量包装生产病毒颗粒和制备质粒载体并对公鼠进行睾丸打点注
射,每隔 7d 注射 1 次,连续注射 4 次,最后一次注射 14d 后,部分雄鼠宰杀采
集睾丸组织,qRT-PCR 检测 Zfy基因的表达水平;另一部分雄鼠与每组超排处理
的雌鼠按 1:1 合笼,间隔 5d 合笼 1 批雌鼠,共合笼 3 批,观察后代的性别比例。
结 果 显 示 , 逆 转 录 病 毒 Retrovirus /Zfy-shRNA
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