小鼠b6品系自突变白斑的遗传学研究.pdfVIP

河南农业大学2012届硕士研究生论文 摘 要 A斑(piebeld)等，关于这些毛色多样性的研究已有一个多世纪，事实证明这些毛色多样的 小鼠为遗传学和胚胎发育学的发展起到了很大作用，并为一些重大科学发现提供了极有价值 的研究一具。白斑突变小鼠由于其表型及突变分子机制与人类某些色素沉着紊乱疾病，比如 斑驳病(Piebaldism)、瓦登伯格综合症(WaardenburgSyndrome)等相似，冈而成为研究 这些疾病的理想实验动物模型。 本实验室白斑突变小鼠为B6遗传背景白发突变，传代试验证实该突变性状稳定且能 够遗传。本研究通过交配测试试验确立了该突变性状的遗传模式，并对突变纯合子进行筛选 和观察，同时对突变基冈进行了定位，确定了候选基冈砌，通过对砌基冈克隆测序找到了 碱基突变位点，从而成功从分子水平上鉴定了白斑突变发生机制，加深了对该突变小鼠的认 识，为艇f基冈及人类斑驳病的研究提供了一种新的材料。本论文由以I-)L部分组成： 1、白斑突变遗传模式的确立 白斑突变杂合子与止常表型B6小鼠交配，获得Gl代小鼠146只，通过统计Gl代小鼠 中突变型与止常璎小鼠数目，并将其与单基因染色体遗传模式理论值进行}方检验，最终确 定突变性状的遗传模式为单基冈染色体遗传。 2、白斑突变纯合子筛选雨I观察 向斑突变杂合子互交繁殖，获得16胎后代，共72只小鼠。在这些子代小鼠中除了lJi常 B6小鼠黑色毛色表型和突变杂合子白斑表巧!外，术山现新表型或白斑I又：域显糟扩人的表型。 通过交配试验证实这些后代小鼠无纯合子，推测纯合子因突变基冈纯合致死，观察并初步确 定是在出生后1—2日龄冈贫血．_夕匕亡。 3、闩斑突变基冈的定位克隆 星引物扩增，分析微甲星标记与突变表耍!问的关系(连锁或重组)，JF通过计算“优势对数 值(LODS)”方法将突变基冈定位丁．小鼠第五号染色体上。繁殖扩火N2样本数量216只， 选择第5号染色体42cM附近两个微卫星标记D5Mit304(4 进行精细定位，通过计算各微卫星标记与突变基因的重组率，根据三点测试原理将白斑突变 个进行功能分析，确定候选基因胁，通过对其cDNA克隆测序，结果显示突变白斑小鼠船 甘氨酸(G)变为精氨酸(R)。 关键词：小鼠； 白斑： 突变： 砌基因 河南农业大学2012届硕士研究生论文 studiesonthe white Genetic spontaneousspotting mutantionofB6strainiUmouse Zhao Supervisor：Prof．Wei—Dong Master Candidate：DongWang coatcolorationvariants Abstract：Mouse including for a micehave tobe and hasbeenstudiedover piebeld，etc．It century．Theseproven beeninstrumentalfor valuableassetsto and andhave many embryologists geneticists mousehasthesame and mutant discoveries．White