学习情境二霉菌发酵制药要点.pptVIP

学习情境二霉菌发酵制药 子学习情境2.1青霉素发酵 任务一 抗生素概述 第一节 抗生素剂量表示法 效价单位 ：每毫升或每豪克中所含某种抗生素有效成分的多少 单位：u/mg 或u/ml 第二节　　抗生素的分类 一、根据生物来源 (一）放线菌产生的抗生素 (二）真菌产生的抗生素 (三）细菌产生的抗生素 (四）其他生物产生的抗生素 第三节 抗生素的用途 一、抗生素在医疗上的用途 （一）控制细菌感染 （二）治疗真菌感染 （三）抗肿瘤 （四）抗病毒 任务二抗生素工业生产概论 第一节?? 抗生素的生产方法 一、微生物发酵法 利用特定的微生物，在一定条件下（培养基、温度、ｐＨ、通气、搅拌）使之生长繁殖，并代谢产生抗生素。用适当的方法从发酵液中提取出来，并加以精制、最后获得抗生素成品。 大多数抗生素用此法制备。 特点：成本低、周期长、波动大 第二节 发酵法生产抗生素的工艺过程 工艺过程： 菌种 孢子制备 种子制备 发酵 发酵液的预处理及过滤 提取及精制 成品检验 成品包装 出厂检验 第三节　抗生素工业生产特点 一、?? 与一般发酵工业相比 （一）菌体生长与产物的形成不平行 （二）理论产量难以用物料平衡计算 （三）生产稳定性差 任务三 青霉素的生产 Ⅰ 青霉素的结构及理化性质 二、青霉素的理化性质 （一）稳定性 干燥纯净的青霉素盐很稳定，有效期都在三年以上，并且对热稳定，如结晶青霉素钾盐在150OC加热1.5小时效价不降低。青霉素水溶液PH=5-7较稳定。最稳定的PH为6-6.5。 （二）溶解度 青霉素本身是一种游离酸，能与碱金属或碱土金属及有机氨类结合成盐类。青霉素游离酸易溶液于醇类、酮类、醚类和酯类，但在水溶液中溶解度很小；青霉素钾、钠盐则易溶于水和甲醇、微溶于乙醇、丙醇、丙酮、乙醚、氯仿，在醋酸丁酯或戊酯中难溶或不溶。如果有机溶剂中含有少量水分时，则青霉素G碱金属盐在溶剂中的溶解度就大大增加。 （三）降解反应 Ⅱ 青霉素产生菌的培养 一、青霉素产生菌的培养 （一）菌体的生长发育 ①分生孢子的Ⅰ期； ②菌丝繁殖，原生质嗜碱性很强，有类脂肪小颗粒产生为Ⅱ期； ③原生质嗜碱性仍很强，形成脂肪粒，积累贮藏物为Ⅲ期； ④原生质嗜碱性很弱，脂肪粒减少，形成中、小空泡为Ⅳ期； ⑤脂肪粒消失，形成大空泡为Ⅴ期； ⑥细胞内看不到颗粒，并有个别自溶细胞出现为Ⅵ期。 其中Ⅰ～Ⅳ期称为菌丝生长期，菌丝的浓度增加很多，但产生的青霉素较少，处于该时期的菌丝体适用于做发酵种子。Ⅳ～Ⅴ期是青霉素分泌期，此时菌丝体生长缓慢，并大量生产青霉素。 Ⅲ 发酵工艺控制 一、青霉素的发酵工艺过程 （一）工艺流程 （二）工艺要点 1、培养基 碳源：葡萄糖母液和工业用葡萄糖 氮源：玉米浆、花生饼粉、麸质粉、玉米胚牙粉、尿素 前体：苯乙酸、苯乙酰胺作为前体，具有毒性，任何时候浓度不能大于0.1% 无机盐：S和P Ca Mg K 钾 30% 钙 20% 镁41% 铁离子 铁离子对细胞具有毒害作用 （三）培养条件控制 菌丝生长繁殖期：糖及含氮物质被迅速利用 球状菌：菌丝发育为球状，菌体浓度迅速增加 丝状菌：菌丝分支旺盛，菌丝浓度迅速增加 青霉素分泌期：菌丝生长趋势减弱，需添加G、 花生饼粉、尿素。青霉素分泌旺盛 球：PH6.6-6.9 球体不可太松，也不可太紧 丝：PH6.2-6.4 脂肪粒消失，中小型空胞 菌丝自溶期：菌体衰老走向自溶PH上升青霉素 分泌下跌 球：球体破裂 丝：大型空胞增加并逐渐扩大自溶 1.加糖控制 丝： 残糖控制在0.6%左右，PH上升以后开始加糖。加糖控制：0-72小时 0.6-0.8% 72小时放罐 0.8-1.0% 加糖率每小时0.07-0.15% 每两小时加一次 球： 当Ph高于6.5，约20之后开始加糖，根据PH高低酌情。 2.补料及添加前体 丝： 接种后8-12小时，发酵液浓度40%左右开始补料发酵单位上升至2500U/ml开始补前体，每4小时 补一次使苯乙酰胺浓度为0.05-0.08% 球： 因发酵基础培养基中没有前体，在10小时左右开始加入尿素、氨水和苯醋酸的混合料，每3小时加一次 3.PH控制 主要通过加G控制PH 丝: PH6.2-6.4 球：PH6.7-7.0 4.温度控制 青霉菌最适生长温度高于最适分泌温度 丝和球都是变温培养，且前期罐温高于后期 丝