赞皇大枣枣疯病植原体分子分类.pdfVIP

中国农业科学 2011,44(21):4429-4437 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2011.21.011 赞皇大枣枣疯病植原体分子分类 1 2 2 2 1 杨海旭 ，王 洋 ，赵彦檩 ，赵 锦 ，刘孟军 1 2 （河北农业大学中国枣研究中心，河北保定 071001； 河北农业大学生命科学学院，河北保定 071000 ） 摘要：【目的】枣疯病是一种重要的植原体病害，本试验旨在明确惟一已知的天然三倍体品种--赞皇大枣枣 疯病植原体的分类地位，为赞皇大枣枣疯病植原体分类研究提供参考。【方法】利用植原体 16S rDNA 通用引物对 赞皇大枣枣疯病病株的DNA进行PCR扩增和克隆测序，通过BLAST 比对进行序列分析，利用临位相连法构建16S rDNA 系统演化树，并应用DNAstar 软件进行虚拟RFLP 分析。【结果】获得的赞皇大枣枣疯病植原体16S rDNA 序列长度 为 1 850 bp （GenBank 登录号GU184180），包括1 529 bp 的16S rDNA 基因全序列、264 bp 的邻近间隔区序列及 57 bp 的23S rDNA 部分基因序列。同源分析表明，赞皇大枣枣疯病病原 16S rDNA 序列与其它植原体的相似性在 87%—98%，其中与榆树黄化 Elm yellows （EY）(GenBank 登录号 l33763)最高相似性为 98%；与大多数二倍体枣 品种的植原体序列相似率达99%以上；其虚拟RFLP 图谱与4 个 16SrⅤ亚组的代表序列图谱差异显著,赞皇大枣枣 疯病植原体延伸因子tuf 基因的序列(GenBank登录号JN001985) 比对结果表明，与其它亚组序列同源性为52.3% —76.7%。【结论】三倍体赞皇大枣枣疯病病原属于榆树黄化组(16Sr V)，并与其中的B 亚组亲缘关系最近；与二 倍体品种的病原分类地位一致，说明枣疯病植原体在系统进化上比较保守。 关键词：赞皇大枣；枣疯病植原体；16S rDNA；分子分类 Molecular Classification of Jujube Witches’ Broom (JWB) Associated Phytoplasma from Ziziphus jujuba Mill. ‘Zanhuangdazao’ 1 2 2 2 1 YANG Hai-xu , WANG Yang , ZHAO Yan-lin , ZHAO Jin , LIU Meng-jun 1 2 ( Research Center of Chinese Jujube, Agricultural University of Hebei, Baoding 071001, Hebei; College of Life Science, Agricultural University of Hebei, Baoding 071000, Hebei) Abstract: 【Objective 】Jujube Witches’ Broom (JWB) is a serious disease caused by phytoplasma. In