发酵工业染菌及其预防资料.ppt

第7章 发酵工业杂菌污染与防治 2.注意菌种保藏 保持环境清洁，防止噬菌体污染； 升高空气进气口，减少噬菌体污染机会。 3.加强厂房周围环境噬菌斑监测 环境检测时如发现宿主平板中噬菌斑增加，发酵罐内可能受噬菌体侵染。 方法：宿主平皿在工厂不同位置放置一定时间，培养，检查有无透明斑。 空气中噬菌体数量增加，污染概率增大。 4.噬菌体抑制剂 ①络合剂： 核酸、蛋白变性失活 三聚磷酸钠：0.2%-0.3%；钼酸0.1% -0.2%；柠檬酸：0.2%-0.5%；草酸盐：0.2% -0.5%； ②非离子去污剂： 聚乙烯乙二醇单脂，聚氧乙烯烃醚，吐温20，吐温60。对抑制噬菌体吸附或在细胞内繁殖显著效果。 这些药物在适当浓度下，并不影响细胞的正常生长。 ③抗坏血酸，谷胱甘肽，L一半胱AA精AA，赖AA： 注意事项：慎重使用！ 5.使游离噬菌体失活 热酸、热碱均能使发酵罐上的游离噬菌体失活。 漂白粉：0.2%；甲醛：1%单独或联合使用，可杀死环境、设备中的游离噬菌体，效果较好。 游离噬菌体广泛存在于空气中，在空压机吸气口加装热水喷淋设施，经80℃左右热水喷淋，可清理杀灭空气中游离噬菌体。 三.噬体菌污染预防 1.定期检查：环境；发酵液；空气 平皿培养法，观察嗜菌斑 2.环境消毒 ①.倒罐时发酵菌液、洗罐水和逃液不能乱排放，需灭菌后排放：含噬菌体及其宿主。 ②.环境消毒：化学消毒剂 A.大面积：石灰 B.室内小面积、器皿：苯酚等，75%乙醇。 C.种子室、摇床室：甲醛熏，UV。 D.发酵系统：高温蒸汽 噬菌斑 小孔与管壁呈45℃夹角；小孔在导入管的分布上呈“上稀下密”，使蒸汽均匀从各小孔喷出。料液从塔的下部经泵（泵之出口压力＞蒸汽压）打入，并在内、外两管间的流速达0.1m/s。蒸汽由塔顶导入，经小孔喷出后与料液，剧烈混合而加热。 喷射式加热器特点： 蒸汽与料液在瞬间混合，充分接触，加热在瞬间完成。 常见的喷射加热器之结构：喷嘴：料液管在中间，料液从中间进入；蒸汽从周围环隙中进入。 蒸汽喷口的环隙面积=料液出口管的内截面积。 喷嘴上方为一高约1m的扩大管，管径为喷嘴的2倍。工作时无噪声。 * 补料设备 空气过滤器 管道 灭菌对象 灭菌的方法 化学法 物理法 加 热 干 湿 热 介 质 过 滤 静 电 除 菌 射 线 UV 发酵工业染菌及其防治 染菌原因 诊断方法 污染防治 发 酵 罐 培养基 发酵辅助设备 对数残 留定律 惯性截 留定律 第7章 发酵工业的染菌与防止 发酵工业的杂菌： 除生产菌种以外的其它微生物均称为杂菌。 发酵工业为纯菌培养，→要消灭一切杂菌，使发酵体系中仅有一种微生物生长。 杂菌的危害：两点 ①影响产品的产量、提取率和产品质量 污染轻的能勉强维持发酵，但杂菌污染时发酵液发粘，菌体自溶，很难过滤→产品提取率与产量。 ②倒罐 严重污染时发生 →防污染对发酵工业至关重要 根除杂菌之途径： ①消灭原料及发酵系统中的一切杂菌： ②防止供气、补料、接种带入杂菌： 本章重点介绍： ①污染的原因及现象： ②污染的防止： ③加热灭菌原理及技术： 灭菌： 用物理或化学方法杀死物料及设备系统内的一切微生物。 消毒： 用物理或化学方法杀死病原微生物营养细胞。杀菌不彻底，尚留有芽孢。 灭菌方法：4 ①加热灭菌； ②化学灭菌； ③射线灭菌； ④介质除菌。 §7.1 加热灭菌理论与技术 一.加热灭菌的原理与方法 1.干热灭菌：作用： ①氧化：生物大分子 ②Pr变性： ③电解质浓缩： 适用范围：适用玻璃器皿等需保持干燥状态物料的灭菌。 常用干热灭菌条件：160～170℃×2-3h。 2.湿热灭菌：作用： ①Pr热变性，酶失活： ②Pr、核酸分子内氢键在高温下发生不可逆破坏，→生理功能丧失。 湿热灭菌效果优于干热灭菌：原因 ①使Pr更易发生不可逆凝固变性： 水存在，鸡蛋蛋清煮熟后变性 ②使热的传导、穿透性增强： 机理：水蒸汽在传递中发生冷凝，形成压力差 湿热灭菌应注意的问题： 蒸汽压与实际温度之关系：！！ 蒸汽压与温度间存在固定的关系： →调节蒸汽压就可控制温度。 但在发酵罐或灭菌锅内有残存空气时，压力与温度间的关系改变：相同压力下的对应温度降低 。 注意：如P=1.05kg/cm2，完全排除空气及不排空气时的压力分别为121℃及100℃。 3.加热灭菌效果的评价指标