miR-181b与炎症关系实验要点.pptVIP

MiR-181b and NF-KBIn vitro and in vivo study 2014-9 Chen yu 细胞实验一：miR-181b对HUVEC功能影响1、TNF-α影响miR-181b表达 (A) Real-time qPCR analysis of miR-181b in response to TNF-α (10 ng/ml) in HUVECs. 短时间作用 不同时间点作用 2、TNF-α作用下，miR-181b影响HUVEC粘附因子表达 蛋白、mRNA、 细胞上清 三个层面证明 ICAM-1、VCAM-1、E-selectin是影响ECs与WBC粘附的主要分子 3、TNF-α作用下，miR-181b影响细胞粘附 细胞实验二：miR-181b靶点的确定1、TNF-α(+)(-)，WB筛查靶点 只使用了miR-181b-m及对照 2、荧光素酶报告系统实验 1、仅使用miR-181b ；2、载体使用浓度梯度 3、用真核细胞表达载体将miR-181b导入细胞 3、miR-181b与靶点结合区域的确认 (D) Normalized luciferase activity of a reporter containing 3′ UTR of importin-α3, predicted miR-181b–binding sites, or mu