小黑杨花粉植株抗虫基因的研究.pdfVIP

摘 要 在建立了小黑扬花粉植株再生优化组培体系： 分，七培养基为 MH+BA0．1mg／L+NAA005mg／L，生根培养基为MH+IBA04mg／L的基础j：进行遗 传转化。 确定农杆菌介导的小黑杨遗传转化体系：在上述分化培养基和生根培养基的基 素，700mg／L头孢唑林钠)。 在建立小黑杨花粉植株遗传转化体系基础上，利用农杆菌介导法向小黑杨檀株 基因组中导入抗虫基因(蜘蛛杀虫肽与Bt基因C末端肽序列连接在一起表达的一 并对其进行分子生物学检测和饲虫试验。 卡那霉素抗性植株的分子生物学检测表明，PCR检测阳性率均为100％． 为l00％。说明外源基因已稳定整合到小黑杨花粉基因组中。 阴性对照植株虫饲死亡率5％～13．3％，阳性植株饲喂舞毒蛾死亡率高于阴性对照植 株饲喂舞毒蛾死亡=率，而且集中在饲虫初期，晓明基因表达产物水平较高。咬食转 2．9 基因植株的尚存活舞毒蛾平均虫体重增加缓’巨，对照体重为处理体重的2．8倍与l 倍，外源基因严重抑制幼虫的生长。说明外源基因在转基因小黑杨中能够『F：常表达， 转基因植株表现一定的抗虫性。 通过分子生