检测口蹄疫病毒抗elisa方法的建立及口蹄疫病毒多抗原基因的融合表达.pdf

华中农业大学硕士研究生论文 摘要 口蹄疫(foot—and—mouth disease virus，FMDV)引起的偶蹄动物共患的急性接触性传染病，人也可以感染。 本病有极强的传染性，可形成大范围流行，造成巨大的经济损失和政治影响。预防 和控制该病的关键是高效疫苗和准确的诊断方法的应用。目前用于口蹄疫的诊断技 术种类很多，而传统ELISA大多用于检测抗体，其抗原需要完整的病毒，生产过程 需要昂贵的培养基，成本高，且存在散毒的危险。检测病毒是确诊病毒感染的标 准，单抗具有特异性高的特点，因此基于单抗而建立的诊断方法具有重要的应用前 景。此外，有研究表明，将口蹄疫具有免疫原性的结构蛋白基因和裂解酶基因(3C 基因)连接起来构建的多抗原基因表达载体，表达后与单一的免疫原性基因相比， 具有较高的免疫原性。本研究开展了抗口蹄疫病毒单克隆抗体的制备及初步应用研 究和口蹄疫病毒免疫原蛋白在大肠杆菌的融合表达。 1抗O型口蹄疫病毒单克隆抗体的制备和初步应用 以纯化的O型FMDV为免疫原，免疫BALB／C小鼠，将脾细胞与骨髓瘤细胞 交瘤细胞，分别命名为2G12和208。染色体数目分析证明为杂交产物，免疫荧光 试验证明两株单抗均能