氟诱导原代大鼠细胞凋亡及bax基因表达研究.pdf

摘要 本试验采用改良的肝脏原位胶原酶灌流法，成功地分离了大鼠 细胞凋亡，研究结果表明： 1．采用改良的肝脏原位胶原酶灌流法能有效的分离实验所需的肝细 胞，分离肝细胞数在2×107／只以上，活率在90％以上； 2．采用MTT法检测氟化钠对大鼠肝细胞增殖的抑制率，氟化钠处理 114．43m∥L； 3．提取氟化钠处理的肝细胞的DNA进行琼脂糖凝胶电泳，可见有明 显的梯状带产生，确定细胞发生凋亡，且具有时间和剂量依赖性；而 对照组无梯状带出现： 4．wjstern blot检测显示氟化钠处理的肝细胞中有凋亡基因bax的 表达，且有时间和剂量依赖性。 结论：氟化钠对大鼠肝细胞即使在低浓度下即有毒性作用，处理12h 现凋亡细胞特征性的梯状带，表明在低浓度下(25m∥L)氟化钠的 毒性作用主要是诱导细胞凋亡，这将为完善饲料氟的监测和食品卫生 中氟的添加剂量标准提供参考作用；wbstemblot检测显示凋亡细胞中 bax表达量增加，它提示氟化钠通过上调bax的表达而诱导的肝细胞凋 亡，为氟中毒分子毒理学机制提供了实验证据，为氟中毒的防治提供 新的思路。 关键词： 氟化钠原代培养大鼠肝细胞 细胞凋亡bax基因表达