未定型鸭肝炎病单克隆抗体的制备及初步应用研究.pdf

未定型鸭肝炎病毒单克隆抗体的制备及初步应用 中文摘要 自1999年开始在我国北京、广东、广西等地接种过I型肝炎弱毒疫苗小鸭广泛 暴发肝炎，其l|岛床特征与I型鸭肝炎类似，但应用I型鸭肝炎弱毒疫苗和高免卵黄 抗体均无明显的防治效果。本研究通过对该病病原分离和血清学比较，初步确定病 原为未定皿清型鸭肝炎病毒。 未定型鸭肝炎尿囊液毒经差速离心和不连续蔗糖／甘油密度梯度超速离心提纯 后，免疫BALB／c小鼠。取其脾细胞与SP2／O骨髓瘤细胞融合，用建立完善的间接 ELISA方法筛选，有限稀释三次克隆，获得一株该病毒的杂交瘤细胞株。经鉴定该 株单抗为IgG。亚类，该杂交瘤细胞的平均染色体为98条。细胞培养上清效价及腹 水效价为l：20000和1：106，与其它病原无交叉，抗体分泌稳定。 以此单抗为基础初步建立了检测未定型鸭病毒性肝炎的夹心ELISA方法。该方 法特异性强、重复性好、敏感性高，是确诊鸭病毒性肝炎的一种快速、有效的方法。 关键词：鸭：未定型肝炎病毒；分离鉴定：单克隆抗体； 未定型鸭肝炎病毒单克隆抗体的制备及初步应用 Abstra