大肠杆菌不耐热毒素b亚单位单克隆抗体的制备及其b细胞线性表位分析.pdfVIP

目 录 岫㈣圳洲ⅧIllIl㈣㈣IllIl洲 Y2621002一 目 录 中文摘要…………………………………………………………………………………………I 英文摘要………………………………………………………………………………………．．III 1引言……………………………………………………………………………………………1 1．1致病性大肠杆菌概述……………………………………………………………………．1 1．1．1产志贺毒素性大肠杆菌………………………………………………………………1 1．1．2产肠毒素性大肠杆菌…………………………………………………………………1 1．2不耐热肠毒素研究进展…………………………………………………………………．3 1．2．1 LT的基因与分子结构…………………………………………………………………3 1．2．2 LT的理化特性和受体结合特性………………………………………………………5 1．2．3 LT的致病机理………………………………………………………………………．．6 1．2．4 LT的免疫原性………………………………………………………………………．．6 1．2．5LT的黏膜佐剂效应……………………………………………………………………7 1。2．6 LT的检测方法………………………………………………………………………．．8 1．3L1’B研究进展……………………………………………………………………………．8 1．3．1L1’B的免疫调节作用…………………………………………………………………8 1．3．2 LTB作为黏膜免疫佐剂的研究………………………………………………………9 1．3．3 LTB单克隆抗体研究进展……………………………………………………………9 1．3．4 LTB抗原表位研究概况……………………………………………………………．．10 1．4研究目的和意义………………………………………………………………………………。1l 2材料和方法…………………………………………………………………………………．12 2．1材料…………………………………………………………………………………………………………………12 2．1．1菌株、质粒、实验动物及细胞系…………………………………………………．．12 2．1．2主要试剂……………………………………………………………………………．12 2 2．1．3主要仪器……………………………………………………………………………．．1 2．1．4 PCR扩增引物………………………………………………………………………．．13 3 2．2实验方法………………………………………………………………………………．．1 2．2．1重组蛋白LTB的表达及鉴定………………………………………………………．13 2．2．2多克隆抗体的制备…………………………………………………………………．15 2．2．3单克隆抗体的制备……………………………………………………………………15 2．2．4单克隆抗体亚类鉴定和效价检测…………………………………………………．．17 2．2．5单克隆抗体的免疫原性鉴定………………………………………………………．．18 2．2．6单克隆抗体的特异性试验…………………………………………………………．18 2．2．7单克隆抗体中和活性试验…………………………………………………………．19 2．2．8LT B亚单位B细胞线性抗原表位的分析…………………………………………．．20 3结果与分析………………………………