奶牛临床乳房炎大肠杆菌主要毒力基因的克隆与序列分析.pdfVIP

＼舢Y咖2㈣86㈣1眦1吣9砒5帆 宁夏回族自治区自然科学基金 (联合资助项目)“宁夏地区牛结核 的分子病原学及不同毒力牛分枝杆 菌刺激下巨噬细胞的凋亡规律研究 121 (项目编号：NZ04)。 宁夏高产奶牛选育项目奶牛育 种专项“奶牛长寿性研究 摘要 为了研究宁夏地区奶牛临床乳房炎大肠杆菌分离株血清型分布和主要毒力基因，采集 2013—2014年宁夏地区临床乳房炎病牛奶样作为大肠杆菌检测的样品，进行分离培养，采用 细菌生化试验进行鉴定。使用大肠杆菌O抗原诊断血清对分离自奶牛临床乳房炎的120株大 f5、eae、cs31a和转运蛋白trat基因。 采集2013—2014年宁夏地区临床乳房炎病牛奶样作为大肠杆菌检测的样品，进行分离培 养，采用细菌生化试验进行行鉴定，120株鉴定为大肠杆菌。 大肠杆菌O抗原鉴定结果：经鉴定120株奶牛临床乳房炎大肠杆菌分离株中有71株检 测出血清型，鉴定出08，010，015，018，022，O26，053，055，068，086， 091，092，093，0101，0107，0117，0126，0142， 49株未鉴定出血清型。 离率，0，eae基因分离率为0，cs31a基因分离率0。实验结果表明肠道内感染和临床乳房 炎大肠杆菌分离株血清型、毒力基因分离率不同。 本实验选取奶牛临床乳房炎大肠杆菌分离株(0158)为样品，设计并合成引物，对fimn 基因进行克隆和序列测定．测序结果显示fimh基因在第714碱基位点位点由T突变为A，在 第717个碱基位点位点由A突变为G，第807个碱基位点位点由G突变为A，第831个碱基 位点位点由T突变为C。 关键词：奶牛临床乳房炎；大肠杆菌；血清型；定居因子；克隆 Abstract To theE．coliisolatesfromclinicalmastitisin strainswere study Ningxia region．120 submittedto somaticandvirulencefactors chain serologicaltestingusing testingusingpolymerase factor and trat reaction(PCR)．colonizationfmd-I，f17，f165，f41，f5，eae，cs31a transportproteins weredetectedPCR． by Clinicalmastitismilkwascollectedasa in from2013to2014．E．coli sampleNingxiaregion isolatesweretestedBiochemical20strainsE．coliisolateswereidentified． by tests，1 120strainsweresubmittedto somatic．120swainswereidentified71 semlogicaltestingusing E．coli were 0107，0117，01260153，0158identified．Advantagessero锣pe0