6.实验六质粒的提取和琼脂糖凝胶电泳检测.pptVIP

一、实验目的 了解高纯质粒小量制备试剂盒和碱法提取质粒的原理 掌握百泰克高纯质粒小量制备试剂盒方法提取质粒的方法 实验原理（碱法） 质粒是一种细菌染色体外的、具有自主复制能力的、共价闭合环状超螺旋结构的小型DNA分子。 碱裂解法提取质粒是实验室常用的方法。 这种方法是根据共价闭合环状质粒DNA与线性染色体DNA在拓扑学上的差异来分离它们。 三、实验仪器、材料与试剂 （一） 仪器 恒温摇床 超净工作台 高压灭菌锅 高速台式离心机 微量取液器、 1.5mLEP管 LB液体和固体培养基 卷纸、无水乙醇、双蒸水 五、实验结果与讨论 1. 实验结果 2. 讨论 附I：碱法提取质粒的原理和方法 (一)试剂等 1. SolutionⅠ 　 50 mmol/L 葡萄糖 　 25 mmol/L Tris.·Cl (pH 8.0) 　 10 mmol/L EDTA (pH 8.0) 高压灭菌后，4℃保存备用。 2. SolutionⅡ(现用现配制) 0.2 mol/L NaOH 　 1% SDS （二）实验步骤 用灭菌的牙签挑取单菌落放入50ml LB液体培养基（含Amp 0.1 mg/ml ）中，37℃振荡培养过夜。 将菌液倒入1.5 ml Eppendorf管中，10,000 rp