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14个肿瘤抗药性基因启动子CpG岛在肝癌中的甲基化状态分析及其意义 14个肿瘤抗药性基因启动子 CpG岛在肝癌中的甲基化状态分析及其意义 硕士研究生 丁 盛 导 师 朱景德 教授 摘 要 为探寻肿瘤抗药性相关基因的表观遗传学变化与肝癌发生、肝癌抗药性之 间的关系，我们用甲基化特异性PCR(MSP)方法在30例肝癌样本与4例正常肝组 织中，对14个抗药相关性基因的启动子CpG岛的甲基化状态进行了分析。每一 例肝癌样本包含来自同一患者的癌组织(C和表型正常的癌旁组织(N)oMSP结果 显示，11个基因(ABCG2,ATF2,B2M,DCK,OCLN,RAFT,RALBPI,SPF45,SKP2, TP53,TOP2B)几乎在所有组织中均呈现未甲基化状态;CAT基因在正常肝组织中 未甲基化，在癌旁组织和癌组织中甲基化比例均为3.3%(1/30).CFTR基因和 GSTP1基因在正常肝组织中均未甲基化，而在癌旁组织和癌组织中甲基化比例较 高。CFTR在癌旁、癌组织的甲基化比例分别为N:50%(15/30)和C:77%(23/30)0 GSTP1为N:56.7%(1.7/30)和C:80%(24/30)。在肝癌细胞系中的MSP结果也显示 CFTR和GSTP1启动子CpG岛有很高的甲基化。RT-PCR检测GSTPI在各肝癌细胞 系的表达情况，结果与甲基化状况吻合。根据这些结果，认为CFTR和GSTP1启 动子CpG岛的高甲基化可能造成两者在转录水平上的低表达;这种表观遗传学 的变化，在肿瘤的发生和诊断中有重要意义。 关键词:肝癌，抗药性，启动子CpG岛，甲基化，甲基化特异性PCR,CFTR基 因，GSTPI基因 复旦大学上海医学院 上海市肿瘤研究所 硕士论文一t 14个肿瘤抗药性基因启动子CpG岛在肝癌中的甲基化状态分析及其意义 MethylationprofileofthepromoterCpGislandsof fourteendrug-resistancegenesinhepatocellularcarcinoma Graduate student ShengDing Prof. JingdeZhu Abstract Toexploretherelationshipbetweentheepigeneticchangesofdrug resistance related genes and hepatic carcinogenesis as wellas HCC(Hepatocellularcarcinoma)drugresistance,thepromoterCpGislandsof fourteendrugresistancegeneswereinvestigatedbyMSP (Methylation specificPCR)methodin4normallivertissuesand30HCCpatientscases, eachpatientcaseconsistingoftheHCCtissue(C)andtheneighboring non-canceroustissue(N)fromthesamepatient.Anditturnedoutthateleven genes(ABCG2,ATF2,B2M,DCK,OCLN,RAF1,RALBP1,SPF45,SKP2, TP53,andTOP2B)showalmostunmethylatedstatusinbothHCCcasesand normallivercontrols;TheCATismethylatedin3.3%(1130)oftheneighboring non-canceroustissues(N)and 3.3% (1130)ofHCC tissues(C)while unmethylatedinnormalcontrols.CFTRandGSTP1，haveaberranth