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1、甲型肝炎减活疫苗与灭活疫苗免疫原性的比较2、孕妇及其母亲hbv标志物的配对研究3、细菌性痢疾的发病率监测与疾病负担研究
孕妇及其母亲I-IBV标志物的配对研究
乙肝病毒在人群中的传播方式有母婴传播和水平传播。随着乙肝病毒抗原抗体系统
的发现,70年代后世界各地相继报道了乙肝病毒的母婴传播。研究表明乙肝病毒母婴传
播率在亚洲最高,非洲中等,欧美最低,分别为30是~70%、20茗~30%、10%左右”。2。“。
母婴传播是我国乙肝病毒传播的重要途径。国内外学者均报道孕妇乙肝表面抗原滴
度、e抗原及其血清乙肝病毒DNA(HBV—NDA)水平与母婴传播的发生概率正相关“‘‘““,
即母婴传播的亲代具有相对较高的病毒含量,而至今未见对孕妇及其亲代血清病毒含量
的相关性进行研究。本次研究旨在探讨高滴度血清病毒含量的孕妇的母亲是否也具有较
高的血清病毒含量以及两者C基因序列的同源性。结合已有的大量的乙型肝炎母婴传播
的吏献及我们既往的研究结果,对孕妇及其亲代所携带的病毒的相关性进行研究。
材料与方法
1.研究对象
年龄、职业及受教育程度调查并采集血清。
2、乙肝感染血清学标志物的检测
操作说明进行。
3、乙型肝炎病毒含量检测
采用深圳市匹基生物工程股份有限公司生产的乙肝病毒(HBV)核酸扩增(PCR)荧
测。
4、血清I-IBVDNA抽提及C基因扩增
DNA滴度较高的孕妇及母亲共7对,
取上述研究对象HBsAg(+)/HBeAg(+)且HBV
DNA,溶于20“
取血清100“l,常规蛋白酶K消化,酚/氯仿/异戊醇抽提法提取HBV
lddtk0。
ACA
ATGCAACTI、TTT CTA
采用引物PCAS(5‘一ACC CAC一3’)及PCAS3(5‘一ATA
—11一
茅j篇 母扫苒母亲HBV标志物的配对研究
一一一一一~一一…一一~~一一一一~一
TTGAGATTC
CC~3’)扩增C基因(nt
Buffer5口1,
10pmol引物PCAS及PCAS3,5Ⅳl模板DNA。
℃延伸10分钟。1%琼脂糖凝胶电泳观察结果。
以本室质粒DNA
p3.81I及HBV阴·}生血清作为阳性与阴性参照。
5、PCR产物序列分析
根据电泳结果,将PCR产物采用肢回收法纯化(上海华舜生物工程有限公司)回收,
PRISM377
溶于22“iddH:0中,分别以引物PcAS3及PCAS,用ABIDNA自动荧光序列
NTI
8.0
分析仅进行(上海博亚生物技术有限公司)测序,用VECTOR SUITE软件进行
氨基酸及核苷酸序列分析。
6、统计分析
经Excel输入数据,使用SAS进行统计分析。
结 果
孕妇及其母亲年龄、孕妇职业与文化程度比较
test,
pO.05)。研究对象的职业及受教育程度分布亦无统计学差异(见表2)。
表l、研究对象年龄分布
}:Student-newman—kouTs
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