鹅源粪肠球菌毒力因子fsrC的克隆表达与生物信息学分析.pdfVIP

摘 要 t婴燮 主菌，在克隆子中进行自我复制；’将构建pET-28a．fsrC重组质粒导入BL21工程 菌，进行转录、翻译，并对fsrC蛋白检测及生物信息学分析。 根据GenBank公布的粪肠球菌fsrC基因序列设计与合成引物；以鹅源粪肠 球菌全基因组为模板，利用PCR技术获得毒力因子fsrC基因片段，与pMDl8-T 克隆载体连接，导入DH5a宿主菌内，进行序列测定。经酶切后得到的毒力因子 表达后，SDS．PAGE检测fsrC蛋白。应用生物信息学软件对fsrC蛋白序列进行 多重比对，构建系统进化发育树状图；分析fsrC蛋白的理化性质和组成成分； 预测fsrC蛋白的结构、fsrCmRNA的二级结构、fsrC蛋白的亚细胞定位和fsrc 蛋白的抗原表位。 ．成功克隆鹅源粪肠球菌毒力因子fsrC，其碱基序列为1326bp，编码441个 结拘：fsrC蛋白三级结构显示毒力因子fsrC蛋白在质膜外形成3个结构域，质 膜内形成1个结构域；fsrCmRNA二级结构，显示双链结构、内部环、发夹环、 多分支环和单链区等多种mRNA二级结构元件；fsrC蛋白分布在分泌通路信号 肽(SP)和质膜的比例较大；fsr