低剂量纳曲酮对鼠腹腔巨噬细胞功能调节的研究.pdfVIP

目录 摘要 中文论著摘要…………………………………………．1 英文论著摘要…………………………………………．3 二、英文缩略语……………………………………………6 三、论文 前—言……………………………………．．…………．7 日U舌……………………………………-·…………·J 材料与方法………………………．．…………………．8 实验结果……………………………………………．．14 讨论…………………………………………………16 结论．．………………………………………．………18 四、本研究创新性的自我评价…………………………．……．．19 五、参考文献………………………………………．．．…．．20 六、附录 综述…………………………………………………22 在学期间科研成绩………………………………………37 致谢…………………………………………………38 个人简介………………………………．．……．……．．39 ·中文论著摘要· 低剂量纳曲酮对小鼠腹腔巨噬细胞功能调节的研究 刖 吾 纳曲酮是一种非选择性阿片受体拮抗剂，对“一，6一，K一阿片受体均有阻 断作用。阿片受体是一类广泛分布于神经系统的膜受体，近年来发现阿片受体亦 广泛分布于免疫细胞上，其免疫调节作用日益受到有关学者的关注。纳曲酮于1984 年经FDA批准上市，以50mg／d的剂量应用于海洛因和阿片成瘾治疗。近年来， 有关低剂量纳曲酮(4．5rag／d)的研究正在逐渐成为热点。自1985年起，不同研 究者开展的一系列临床先导性研究表明，低剂量纳曲酮对于诸如克罗恩病、AIDS、 某些肿瘤和多发性硬化症等免疫相关疾病有着潜在的治疗价值。巨噬细胞广泛存 在于机体组织中，是机体重要的免疫细胞，发挥着广泛的免疫功能。经典激活巨 噬细胞有吞噬杀伤，释放炎症介质，提呈抗原和调节并促进Till型免疫的功能， 原体和肿瘤细胞。腹腔巨噬细胞多游离存在于腹腔的腹水中，易于获得，因此进 行体外实验时往往选用小鼠腹腔巨噬细胞为研究对象。目前关于低剂量纳曲酮对 小鼠腹腔巨噬细胞是否存在活化作用，以及不同浓度的低剂量纳曲酮对小鼠腹腔 巨噬细胞的免疫调节是否存在差异这些方面的研究，国内外未见报道。本研究利 用体外培养的小鼠腹腔巨噬细胞，给予不同浓度的低剂量纳曲酮刺激，通过酶联 免疫吸附试验等检测手段，检测相关指标并做出统计分析，旨在为后续的实验室 和临床研究提供一些参考。 方 法 所用实验动物为清洁级6．8周龄雌性BALB／c小鼠，无菌灌洗提取腹腔巨噬 细胞，贴壁纯化培养，鉴定合格后用于后续实验。预实验通过比对各浓度低剂量 纳曲酮刺激下巨噬细胞培养上清中NO水平确定低剂量纳曲酮作用于小鼠腹腔巨 噬细胞的适宜浓度和作用时间；正式实验在适宜浓度和作用时问下收集细胞培养 上清，利用一系列试剂盒检测相关指标并做统计分析。 结 果 1、无菌灌洗提取腹腔细胞，贴壁纯化培养，经台盼蓝染色鉴定细胞存活率99％， 瑞氏一姬姆萨染色鉴定巨噬细胞纯度98％。 2、1 o．8M的低剂量纳曲酮处理组96h培养上清中H202的含量与空白对照组比较 显著升高(PO．01)。 3、10’8M的低剂量纳曲酮处理组96h培养上清中NO的含量与空白对照组比较显 著升高(P0．01)。 4、10‘8M的低剂量纳曲酮处理组96h培养上清中TNF．仅的含量与空白对照组比较 显著升高(P0．01)。 比较显著升高(PO．01)。 结论 1．低剂量纳曲酮对体外培养的小鼠腹腔巨噬细胞的功能存在活化作用，且不同 浓度的低剂量纳曲酮对巨噬细胞的功能活化程度不同。 2． 10{M的低剂量纳曲酮作用96小时，可以显著地促进体外培养的小鼠腹腔巨 噬细胞产生NO，H202等活性物质。 3． 10。8M的低剂量纳曲酮作用96小时，可以显著地促进体外培养的小鼠腹腔巨 噬细胞分泌TNF．0【、IL．12等促炎性细胞因子。 关键词 巨噬细胞；低剂量纳曲酮；阿片受体；免疫调节 2 ● 英文论著摘要 ● ” ■●