血小板聚集功能检测和临床应用.pdf

血小板聚集功能的检测及 血小板聚集功能的检测及 临床应用 临床应用 广东省人民医院 广东省人民医院 广东省医学科学院 广东省医学科学院 病理医学部检验科 病理医学部检验科 李广华 李广华 前 言 血小板聚集功能的检测对于抗血小板药物 的疗效监测，出血性疾病的鉴别和诊断以 及对血栓性疾病的监测都具有重要的意义。 Born于1962年首先应用比浊法检测血小板 聚集功能，该技术是测定血小板聚集功能 的经典方法 ，应用最为广泛 。 血小板的聚集是由各种诱导剂与血小板膜受体之 间的相互作用而诱发的：这种相互作用通过膜的 传递而激活血小板,使其膜表面另一个糖蛋白 IIb/IIIa受体活化,再与血浆中的纤维蛋白原结合,介 导血小板聚集。（三要素：GPIIb-IIIa和钙离子、 纤维蛋白原） 目前认为有三条途径： 1.ADP途径，ADP 、胶原、凝血酶、肾上腺素等 均可诱导血小板释放内源性ADP 。后者可引起血 小板聚集。 2.TXA2途径：PGG2、PGH2及TXA2可诱导血小 板发生聚集反应，但不依赖ADP途径。 3.PAF途径：PAF通过与血小板膜上的PAF受体 结合而发挥作用，引起血小板聚集。 目前血小板聚集功能的检测已经从传统的 手工法发展到全自动仪器的检测,从单一的 比浊法发展到阻抗法,剪切法,流式细胞术法、 模拟体内初期止血（PFA-100 ）等等, 从单 一的测定血小板聚集功能发展到能同时检 测血小板释放ATP和血小板内Ca2+的含 量，血小板释放颗粒及活化功能的测定， AA代谢产物测定，血小板内环腺苷酸 ( cAMP)和环鸟苷酸 ( cGMP)测定，血小板 活化的新标志物等等。 原理（比浊法） 将富血小板血浆(PRP)置于比色管中,加入 诱聚剂(主要有ADP 、肾上腺素,胶原,凝血 酶、花生四烯酸、TXA2,PAF等),用一涂硅 的小磁粒进行搅拌,血小板逐渐聚集,血浆浊 度降低,透光度增加,记录此变化,形成血小板 聚集的动态曲线,以PRP的聚集率和透光度 为0%,乏血小板血浆(PPP)所测得的聚集率 和透光度为100%,用血小板聚集仪进行自动 测定、记录、描绘血小板聚集曲线。 不同诱导剂可产生不同类型的血小板聚集曲线： ADP诱导血小板聚集在低浓度时(3umol/L)是可 逆性聚集,即初期聚集波、还能引起血小板释放 ADP 而产生第2个聚集波;在高浓度时(3ugmol/L) 是不可逆性聚集。可使全部血小板对外源性ADP 产生反应而立即得到1个单一的聚集波； 适当浓度的肾上腺素亦可引双聚集波曲线,胶原引 起的聚集曲线与ADP和肾上腺素不同,不能直接聚 集血小板,而是引起血小板内释放ADP等诱导聚 集； 瑞斯托霉素与vWF相互作用引起血小板GPIIb/IIIa 受体激活而导致小板聚集。 血小板聚集试验（阻抗法） 原理 可用全血或PRP进行检测。检测杯中 有一对铂电极，血小板在诱导剂的诱导下发 生聚集时，可覆盖在铂电极表面，导致电阻 抗的改变，后者的变化程度与聚集程度有关。 此信号经过放大传送到监测器或计算机上进 行处理，将电阻抗的改变转换为聚集曲线从 而计算出血小板的聚集率。 阻抗法的优点 直接使用全血 全血中的其他血细胞同时存在，从而真正模拟 了体内的生理环境 保存全部血小板，避免部分血小板因体积太大 而在制备PRP时丢失 对于脂血标本的检测，可以克服光学法检测时 因过于浑浊而影响结果 全血电阻聚集仪与光学法相比，检测高凝状态 时的血小板功能更为敏感 阻抗法的不足之处 光学聚集仪耗时,对小聚集物的形成不敏 感,，操作相对烦琐。 阻抗法与比浊法的结果无法换算。 尚缺乏大量应用的经验。 血小板功能分析仪( PFA-100) 这是近年才出现的新仪器 , 目前PFA-100系统是 血细胞功能检测研究最多的方法之一。它在高切