抗人b7-2人鼠嵌合抗体的制备及抗肿瘤作用研究.pdfVIP

抗人B7-2人．鼠嵌合抗体的制备及抗肿瘤作用的研究 中文摘要 中文摘要 目的：制备抗人B7．2人一鼠嵌合抗体(命名为chlDl)并研究其抗肿瘤作用。 方法： l、嵌合抗体chlDl的制备、纯化及效价鉴定 800mg／mL)加压筛选及亚克隆化培养后，挑选高表达株，无血清大批量培养，收集 上清。应用ProteinG亲和层析法分离纯化，紫外分光光度法定量。收集生长良好 管加入ehlDl，经间接免疫荧光及流式细胞术分析，以出现最高阳性率时的最小用 量定为抗体的效价。 2、嵌合抗体ehlDl对膜型B7-2分子的识别 同时以鼠源性的亲本抗体1D1作抗体对照，并以L929．B7-2为细胞株的阳性对照。 3、嵌合抗体chlDl对Raji细胞的生长抑制及诱导凋亡的作用研究 将终浓度为101．tg／mL 胞的增殖抑制效应。流式细胞术检测细胞的凋亡率。 4、嵌合抗体chlDlFc段介导的ADCC及CDC效应分析 ehlDl，培养4h、24h、 细胞为效应细胞，Raji为靶细胞，加入终浓度