抗动物钙调素单隆抗体的制备及胞外钙调素对细胞增殖影响的研究.pdfVIP

中文摘要 抗动物钙调素单克隆抗体的制备及胞外钙调素 对细胞增殖影响的研究 摘 要 目的：本文以疏水亲和层析法纯化牛脑钙调素(CAM)作 为免疫原，采用杂交瘤技术制备鼠抗动物CaM单克隆抗体， 并对其性质进行鉴定，以期得到高特异性、高效价的抗体， 用于CaM生物学功能的研究；应用MTT法，研究胞外CaM 及鼠抗动物CaM单克隆抗体对L929成纤维细胞增殖的影 响。 方法： fast 6 flow疏水亲和层析纯化 1应用PhenylSepharose 牛脑CaM。 2应用SDS．聚丙烯酰胺凝胶电泳法和紫外分光光度法 鉴定纯化的牛脑CaM。 3应用碳二亚胺法将纯化牛脑CaM与卵清蛋白相偶联 作为免疫原，结合杂交瘤技术制备鼠抗动物CaM单克隆抗 体。 4应用免疫印迹法、免疫酶斑点法和液相竞争法鉴定鼠 抗动物CaM单克隆抗体的性质及效价。 的影响。 成纤维细胞增殖的影响。