基因工程重组乳乳球菌的构建.pdfVIP

。 中 文 摘 要 acidbae． 目的构建含有过氧化氢酶基因(catalase，cat)的基因工程乳酸菌(Lactic teria，LAB)，为发展环境抗性的基因工程乳酸菌提供试验方法，奠定理论基础。方法培 养大肠杆菌(E．eoli 切，分离纯化1．5Kb以上的DNA片段o BamHI酶切大肠杆菌质粒pUCl8后，与经 酸培养介质，先厌氧培养，再有氧培养，诱导过氧化氢酶酶活性，从而筛选出含有过氧化 氢酶的基因克隆。将筛选出的基因片段与经BamHI酶切后的乳酸乳球菌表达载体质粒 Nz9000一eat，对重组菌株进质粒抽提，鉴定。结果分离到了大肠杆菌过氧化氢酶基 cat基因。为E．colicat基因 酶Sau3AI部分酶切大肠杆菌基因组DNA，并筛选出E．eoli 通过载体pRY300