碱性成纤维细胞长因子基因诱导表皮细胞去分化的实验研究.pdfVIP

中 文 摘 要 表型改变，建立bFGF基因诱导表皮细胞去分化的体外实验模型；3．检测FGFR2在不同 发育时期胎儿皮肤中的表达和分布，初步探索bFGF调控表皮细胞去分化的分子机制及 FGFR2在皮肤发生、发育中的作用，为寻找调控表皮细胞去分化的内在驱动力提供实验 基础，为深入研究皮肤的创伤修复与再生提供实验参考。方法 1．参考分子克隆技术， EcoR I限制性内切酶酶切位点，将bFGF cDNA定向插入pEGFP—C3的多克隆位点中， 构建真核表达质粒pEGFP—C3一bFGF，并对重组子进行DNA序列测定o2．采用脂质体 (LipofectamineTM 中，在荧光显微镜下观察基因瞬时表达情况及细胞形态。以同期培养的表皮细胞及 pEGFP—C3转染的表皮细胞作为阴性对照，免疫细胞化学染色和免疫荧光标记法检测实 改变，建立bFGF基因诱导表皮细胞去分化的体外实验模型。3．对不同发育时期胎儿皮 肤取材、固定、制成石蜡切片，S—P法检测FGFR2的表达及分布。结果1．构建了含有 bFGF bFGF基因转染率为31．6％，转染阳性细胞体积小，呈圆形或圆梭形，核质比大。免疫细 染色结果显示，转染阳性细胞主要在细胞核、胞浆和胞膜中表