复方甘草酸苷对脏冷缺血损伤的保护作用及hmgb1调控作用的实验研究.pdfVIP

复方甘草酸苷对大鼠离体肝脏冷缺血损伤的保护作用及HMGBl调 腓嚣誉碱删删 摘 要 Y曼里!竺!。。 目的：探讨复方甘草酸苷 Compound 肝脏冷缺血损伤的保护作用及其对高迁移率蛋白B1 Hi曲Mobility Group 的措施。 组 HTK保存液中不加入CG，假手术组灌注后仅做游离。运用肝脏离体非循 Isolated Ratliver 环再灌注模型 AcyclicReperfused 的改进型模拟大鼠肝脏冷缺血模型。肝脏冷缺血12h后0．4％台盼蓝溶液给予 门静脉灌注测定肝脏微循环；观察冷缺血12h后的病理形态改变；测定肝脏 冷保存12h后大鼠肝脏灌注流出液的酶学；使用酶联免疫吸附测定法 ImmunoSorbent 2h后 Enzyme．Linked Assay，ELISA 分析大鼠肝脏冷保存1 炎症因子表达水平；末端转移酶标记法 TUNEL法 测定大鼠肝组织细胞凋 亡水平；免疫组织化学技术测高迁移率蛋白B1 HighMobilityGroup Like Box，HMGBl ，Toll样受体4 Toll4，TLR4 ，K基因结合 Receptor 的核因子 NuclearFactor b，NF—Kb 。运用SPSS OfKappa 件行统计学分析，实验的统计数据以 女±S 表达，当P 0．01表示结果 有统计学差异。 结果： 1．微循环检测：使用0．4％台盼蓝溶液在冷保存12h后给予门静脉灌注， o 比较无统计学差异。 17．92±11．51 灌注流出液中ALT含量分别为： 155．10_17．36 U／L、 1 U／L、 1 O．01 ，高于SHAM组 3．94 1．05 干预组组内比较， 2 组低于CGL组 P 0．01 。 内IL-6含量分别为： 1 组低于CGL组 P 0．01 。 为： 36．7±2．1 cellnumber／InIIl2、 30．3±3．4 cell ±2．1 cellnumber／姗¨低于CON组的 42．6±2．1 cell l 0．01 ，但明显低于SHAM组 7．6±1．1 cel 6．免疫组化显示：各组肝脏冷缺血12h后肝细胞均存在NF．Kb蛋白 存在不同程度的表达，CGL组、CGM组、CGH组NF．K b蛋白表达指数分别 为： 6．33±1．45 、 5．54±1．63 、 3．1 干预组组内比较，CGL组与CGH组比较p o．01 。 O．01 。 组、CGM组与CGH比较◇ o．01 。 结论： 1．CG干预减轻肝脏冷缺血期炎症损伤，改善肝细胞功能。 2．CG的保护作用可能是通过抑制HMGBl_TLR4一NF．Kb的表达减轻 肝脏冷缺血期炎症损伤。 关键词：复方甘草酸酐；大鼠；离体肝脏；冷缺血；肝脏保护；高迁移 率蛋白B1：Toll样受体4：K基因结合核因子：肿瘤坏死因子：白介素一6 4 LivertissueSSUeof an ofHMGBl compoundcompoundglycyrrhizinglycyrrhizinand,gulationregulauon inrats isolatedlivercoldischemia injury Abstract ratlivercoldischemiafromnon modelof Objective：Using cyclicreperfusion inliver of the simulatedliver animal improved transplantationpreserved，In invitroof effectonliver experimentsCompound coldischemiaandofthe B injury highmobility 1 HMGB1 groupprotein to its ordertofurther regulation，andinvestigatepossiblemechanism，in the ofdonorliverinliver andmodified improvepreservation transplantation solution the transplantorganspreservationprovidestheorysupport． Method：1 00 adultSDratswere dividedintofive heathy randomly for solutionused cold were groups．Accordingpreservation preservation dividedintoCG-intervention andthe randomly gro