大鼠皮肤切创愈过程中inos和enos表达的时序性变化.pdfVIP

中文 摘 要 大鼠皮肤切创愈合过程中iNOS和eNOS 表达的时序性变化 摘 要 目的:观察大鼠皮肤切创愈合过程中诱导型一氧化氮合 酶 induciblenitricoxidesynthases,iNOS 和内皮型一氧化氮 合酶 endothelialnitricoxidesynthases,eNOS 蛋白表达的变 化，以探讨其在法医实践中用于推断损伤时间的可能性。 方法:建立大鼠皮肤切创伤模型，应用免疫组织化学技 术 SP法 和图像分析方法，研究不同损伤时R, 生前伤1h-14d 大鼠皮肤创缘组织中iNOS和 eNOS蛋白表达的变化及死后 不同时问对 iNOS和 cNOS蛋白的影响。 结果: 1 生前伤不同时间iNOS蛋白表达的变化:各时 间点创口对侧组织未见iNOS蛋白表达。大鼠皮肤切创伤后 角阮细胞、汗腺、毛囊和骨骼肌细胞及创伤后肉芽组织的炎 细胞、成纤维细胞、血管内皮细胞均不同程度的表达 iNOS 蛋白，免疫组化染色 iNOS蛋白呈棕黄色颗粒样分布于上述 细胞胞浆。①肉芽组织:创伤后6h，创缘附近浸润的巨噬细 胞、中性粒细胞开始表达iNOS蛋白，呈弱阳性染色;12h, 阳性染色的巨噬细胞和中性粒细胞增多;创伤后 ld,iNOS 蛋白表达量达到高峰，并以较高水平维持至伤后5d，可见到 强阳性颗粒分布于炎细胞、成纤维细胞、血管内皮细胞胞浆; 7d-14d，仍可见到成纤维细胞、纤维细胞、新生毛细血.管内 皮细胞表达iNOS蛋白，但阳性细胞数目逐渐减少，且染色 程度逐渐减弱。②表皮:创伤后1h，创缘角肮细胞表达微量 中文 摘 要 NOS，染色呈弱阳性，随着创伤时间的延长，角阮细胞表达 NOS蛋自逐渐增强。创伤后 12h,NOS蛋白表达量明显增 强，染色强阳性;3d达到高峰，并以较高水平维持至伤后 7d，之后略有下降，至伤后14d仍为阳性表达。③汗腺:创 伤后 lh，汗腺细胞开始表达微量的NOS蛋白，随着创伤时 间的延长，NOS蛋 白表达量逐渐增强。创伤后 Id-5d，达到 一高峰平台，染色呈强阳性;7d-14d表达量逐渐下降，染色 呈弱阳性。④骨骼肌:创伤后1h，骨骼肌细胞开始表达微量 的NOS蛋白，随创伤时间的延长NOS蛋白表达量略有增 强，伤后 7d达到峰值，之后开始下降。本实验结果显示， 创伤愈合过程中NOS蛋白在皮肤各部位的表达均具有先升 高后降低的变化趋势。其中，NOS蛋白在肉芽组织的表达 呈现相对明显的规律性，可较好的反映与损伤时间的关系; 其次是汗腺;NOS蛋 白在表皮表达最明显，其峰值最大， 但是变化趋势相对不明显:NOS蛋白在骨骼肌细胞的表达 也有一定的规律性，但NOS蛋白表达量明显低于其他部位， 用于推断损伤时间的可行性较小。 2 死后不同时间对NOS 蛋白的影响:观察死后6h至48h对生前伤Id,3d,5d大鼠 皮肤NOS蛋白的影响，结果显示，NOS蛋白染色强度随死 后时间的延长呈现不同程度的下降。创伤3d大鼠在死后 12h 内，表皮、汗腺和骨骼肌中NOS蛋白阳性染色强度变化不 明显 P 0.05 ，死后24h和48h,NOS蛋白阳性染色强度 明显减弱，与生前伤比较有显著性差异 P 0.05 ;肉芽组 织中NOS蛋白仅在死后6h内稳定性较好，死后12h至48h, NOS蛋白染色强度明显下降。创伤1d,5d大鼠死后6h,24h 和48h,NOS蛋白染色强度下降程度与创伤3d大鼠类似:而 中文 摘 要 死后 12h，表皮和汗腺 iNOS蛋白染色强度已明显下降 P 0.05 0 3 生前伤不同时间 eNOS蛋白表达的变化: eNOS蛋白在创口对侧组织的角阮细胞、血_管内皮细胞、成 纤维细胞、汗腺和骨骼肌细胞均有微量表达，阳性物质呈棕 黄色颗粒样分布于细胞胞浆。①肉芽组织:创伤后 12h，创 缘附近浸润的巨噬细胞eNOS蛋白表达增强:创伤后Id，创 底肉芽组织中cNOS蛋白表达量达到第一次峰值，强阳性染 色分布于血管内皮细胞、成纤维细胞和炎细胞;3d-5d,eNOS 蛋白表达量略微下降;7d，再次达到高峰，可见到肉芽组织 中新生毛细血管内皮细胞呈强阳性染色，成纤维细胞及纤维 细胞呈阳性染色，之后肉芽组织中eNOS蛋白表达量逐渐下 降，至伤后 14d仍高于对照组。②表皮:创伤后 12h，角肮 细胞eNOS蛋白表达量明显增强，染色呈强阳性;Id-3d，略 微下降;7d达到高峰，染色呈强阳性;之后eNOS蛋白表达 量逐渐下降，至伤后 14d，角阮细胞呈弱阳性染色。③汗腺: 创伤后 12h，汗腺细胞eNOS蛋白表达明显增加，达到第一 次高峰，染色呈强阳性;创伤后Id,eNOS蛋白表达量减弱， 至创伤后 5d-7d，再次达到高峰，呈强阳性染色;IOd-1