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- 2016-03-08 发布于天津
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生物芯片制备方法-基片处理
生物芯片制备方法-基片处理封闭
本节主要以目前应用较广的微阵列芯片为例介绍生物芯片的制备方法。微阵列芯片的主要原理是在活化的上利用机械或化学的方法制备各种生物分子包括DNA、蛋白质等的矩阵排列。
图1:百级洁净间图例。摘自Telechem公司网页。
9.1基片处理
制备微阵列芯片常用的材料包括无机材料如玻璃、硅、金聚合物材料等。目前采用较多的是玻璃。
9.1.1 氨基基片和环氧基基片的制备
前文已经提到,氨基基片和环氧基基片的制备通常通过硅烷化试剂在玻璃表面的反应来得到。反应原理见图2。
图2:氨基基片和环氧基片反应原理
将清洗干净的玻璃(-OH表面)在硅烷化试剂(含有氨基或环氧基基团)溶液中反应一定时间后就可以得到氨基或环氧基基片。其它如巯基基片也可以通过类似反应得到。
9.1.2 醛基基片的制备
在完成氨基基片或环氧基基片制备后,用戊二醛作用于氨基基片,或者用NaIO4作用于环氧基基片均可以得到醛基基片。
图3:醛基基片制备原理
9.1.3 PLL基片的制备
将清洁的玻在聚赖氨酸溶液浸泡处理即可以得到聚赖氨酸片。而且PLL片的制备过程较醛基、片都要简单的多,因此在生物芯片中常常用到。赖氨酸是一种碱性氨基酸,在通常的pH环境下带正电。多聚赖氨酸也带有大量的正电荷,经过清洗处理过的玻璃表面(富含-OH)带有大量的负电荷,所以多聚赖氨酸可以以静电相互作用力结合于玻璃的表面。而DNA分
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