hif-1α基真核表达载体的构建及其在肿瘤细胞凋亡中的作用.pdfVIP

O 中 文 摘 要 研究背景缺氧诱导因子一l是缺氧条件下广泛存在于哺乳动物和人体内的一种 转录因子，可调节多种靶基因如血管内皮生长因子(VEGF)，红细胞生成素(EPO)等的表 达，它的活性对维持肿瘤细胞的能量代谢、促进血管生成及抑制细胞凋亡起着重要作用。 研究缺氧诱导因子对肿瘤细胞生长和凋亡的影响，对于进一步阐明肿瘤发生、发展规律， 表达载体，转染细胞来研究HIF一1对肿瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法从乳腺癌细 胞MDA—MB-231中提取HIF—la (+)中。采用阳离子脂质体法将表达载体转入SK—BR一3细胞，用WesternBlot检测 HIF一1 0【的表达情况，记录生长曲线，结合Hoeehest凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡。结 片上，荧光倒置显微镜下观察估计其转染效率约为20％。经WesternBlot检测转染后实 验组SK—BR一3的HIF—l仅的表达增强，连续9天的细胞计数细胞生长较对照组旺盛， 凋亡和促进肿瘤细胞生长的作用。 关键词HIF—lot细胞生长细胞凋亡 本课题受国家自然科学基金项目308