hlif转基因养层细胞对脐血cd34lt;#39;+gt;造血干祖细胞增殖和分化的影响.pdfVIP

hLIF转基因饲养层细胞对脐血CD34+造血干，祖细胞增殖和分化的影响 中文摘要 中文摘要 目的： 分别建立逆转录病毒载体和腺病毒载体介导的转人白血病抑制因子(human leukemia inhibitory 造血干／祖细胞增殖和分化的影响，体内研究对辐射损伤SCID小鼠造血功能恢复 的效果。 方法： 将本科室构建和保存的hLIF基因重组逆转录病毒载体经鉴定正确后转染 293T人胚肾成纤维细胞，经抗生素Zeocin筛选后获得稳定的转基因饲养层细胞， 养层细胞中的转录和翻译；将本科室保存的重组腺病毒Ad．hLIF感染WI．38人胚 表达；采用免疫磁珠法分离脐带血CD34。+造血干／祖细胞，流式细胞术检测其纯度； 将CD34+造血干／祖细胞分别与上述饲养层细胞共培养，流式细胞术检测各组增殖 效果；扩增后的造血细胞经CFDA SE(Carboxyfluorescein 法检测小鼠骨髓内含Alu基因人源细胞的归巢情况。 结果： 建立的逆转录病毒载体介导转hLIF基因饲养层细胞经Zeoein筛选