tpo受体胞内相互作用蛋白的筛选与初步功能研究.pdfVIP

博士论文；摘要 TPO受体胞内区相互作用蛋白的筛选与初步功能研究 摘要 TPO是重要的造血生长因子，主要调控巨核细胞的增殖和血小板的生成，并 能与其它因子协同作用，支持多能造血祖细胞的存活和分化。TPO通过与细胞膜 广泛的生理作用有重要意义。 (JAK2)，引起受体胞内区酪氨酸残基的磷酸化，从而引发下游s1Ⅺ、 被激活；而去除M口I胞内区所有酪氪酸残基，TPO仍可支持TPO依赖细胞株的 增殖，这些都说明细胞内尚存在其他未被认识的TPO受体信号转导通路。寻找新 的介导TPO信号的蛋白质是本研究的目的。 我们以Mpl胞内区蛋白为诱饵，利用酵母双杂交的方法从小鼠胎肝文库中钓 取了16个可能同M口l胞内区存在相互作用的基因片段；然后通过哺乳动物细胞 内双杂交实验进～步筛选，去除其中2个在此系统下同Mpl没有相互作用的片段； 在剩余的14个基因片段中，通过对基因的功能和细胞内定位分析。选取了8个可 能同Mpl胞内区存在相互作用的基因片段继续研究，克隆了此8个基因片段的全 长序列，并利用哺乳动物细胞内双杂交实验对全长基因同M口l的相互作用进行验 证，结果这8个全长基因同MDl胞内区均存在相互作用。我们选取其中的两条基 因(R